1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
研究意义：随着全球环境的恶化，全球气候变暖，海平面不断上升等自然因素以及工业生产发展，环境污染加剧，淡水资源匮乏，海水入侵，农田灌溉方法不当等人为因素使自然条件下的作物面临生长困境。而干旱高盐、高温、低温、土地盐碱化等逆境条件严重影响植物农作物的生长和发育，并成为农作物产量和质量显著下降的重要原因。因此，如何提高农作物抗逆性是农业生产中迫切的需要解决的重大问题。
植物脂信号参与盐害、高温和冻害等各种非生物胁迫。磷脂酶d代谢产生的pm（磷脂酸）是植物体内重要的信号分子。本研究以拟南芥为实验材料，研究磷脂酶d在植物抗热害中的分子细胞机制，揭示其与细胞骨架的作用关系，并研究其下游的可能靶蛋白，最终揭示一条基于脂信号的植物耐高温信号新通路。
研究概况：磷脂介导的细胞骨架组织对多重压力的植物形成一个重要的机制。然而，其中潜在的分子机制仍知之甚少。植物细胞骨架（包括微管和肌动蛋白丝）作为一个动态细胞成分，并参与细胞生长、形态发生和响应生物、非生物胁迫。[1] 植物皮质微管，在质膜内表面附近通过接头蛋白进行动态重组，感受外部刺激，如干旱、盐碱和高温，或同质膜上的蛋白质或脂质合作来直接转到信号到内部调制器。[2] 质膜上的na /h 逆向转运蛋白，sos1 ，盐胁迫下细胞外的na 泵，和sos1敲除基因都抑制微管破坏和螺旋表型增长。[3]进一步的研究表明，spr1，通过26s蛋白酶体降解, 来调节盐胁迫诱导的微管组织和植物需要的的耐盐性。[4] 拟南芥微管相关蛋白65-1 (map65-1), 由磷脂酸严格监管，固定在盐胁迫中皮质微管。[5]在这里，我们可以证明是拟南芥等离子通过膜定位使磷脂酶d，pld（人磷脂酶d）直接结合到不稳定的微管上。而通过总结前人研究的经验我们总结出：在拟南芥热耐受活动依赖性中，是等离子膜结合pld去稳定微管，而不是响应热休克中的亚细胞定位。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：
1）明确磷脂酶d在植物中对于调控植物耐高温的分子机制；
2研发初步揭示一条新的植物耐高温的信号途径，为提高农作物的产量提供遗传证据。
3. 研究的方法与方案
研究方法：
1）材料：gfp-pldδ材料由matsx. andersson（哥本哈根大学）提供，然后进行挑选
2）材料培养：按照实验需求严格挑选培养
4. 研究创新点
1）拟南芥种子经过严格的培养挑选，转基因处理，荧光标记
2）gst-pldδ与微管共沉积或解聚，然后进行凝胶扫面
3）用黄草消处理培养拟南芥
5. 研究计划与进展
该项目计划周期为九个月，主要分三个阶段完成，具体计划如下：
第一阶段：2014年8月2014年12月，主要熟悉实验室环境，为实验做好准备工作，着手培养拟南芥幼苗，熟悉实验操作思路及具体过程，熟练ms的配制和使用，电泳、pcr等实验技术，为以后的实验过程打好基础；
第二阶段：2015年1月2015年4月中旬，这段时间为实验的重要阶段，在这段时间里所应完成任务是：熟悉拟南芥每个处理的植株，并依次进行处理，针对磷脂酶d和微管进行一系列实验，得出实验结果；
