1. 研究目的与意义
植物酯酶源丰富,取材方便,制备简单,可利用植物酶的抑制技术测定果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药。而酶液不易保存,适用范围有限,本文拟探讨影响固定化效果的重要影响因素,如吸附量、吸附pH、温度等,为酯酶的广泛应用提供了科学依据。
2. 国内外研究现状分析
朱玲等采用活化载体一共价结合法和戊二醛交联法,研究尼龙网上胆碱氧化酶的不同固定方法对酶活力的影响,发现用改进后的活化载体一共价结合法固定的酶活力高,使用寿命长,酶不易损失,重现性好。
土继军以戊二醛(ga)为交联剂采用共价交联法,把自己制备的植物酷酶固定在聚苯乙烯微孔反应板上,采用目视比色法进行有机磷农药的检测,检测的灵敏度为0. 01-0. lmg/kg,采用这种方法,灵敏度有较大提高。
albareda sirvent等用戊二醛交联法将乙酞胆碱酷酶固定在铜扮碳糊电极表面,所构成的传感器可检测10-10mo 1 /l的对氧磷和10-limo 1 /l的克百威,检测加标的自来水和果汁,回收率接近100%,可用十直接测定这两类样品中2种农药的残留。
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3. 研究的基本内容与计划
研究内容:
利用树脂作为载体戊二醛作为交联剂对植物酯酶进行固定化,研究其最优固定化条件和稳定性.通过改变酶液量、温度、时间、ph值、和添加的交联剂浓度温度时间等条件,测定不同吸光度,探究不同因素对酶活的影响。
研究计划:
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4. 研究创新点
以树脂为载体的固定化植物酯酶与游离的植物酯酶之间酶学性质的比较,探究树脂固定化酶的所具有的优势。
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