莱茵衣藻胞内磷含量对砷耐性的影响研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1 国内外研究动态砷（as）是元素周期表中第四周期第Ｖ主族的类金属元素，其在地壳中丰度列第20位[1]。

砷（as）作为一种在自然界中广泛分布有毒的类金属，普遍存在于土壤、矿物、水体和生物体内，其毒性被列为i 类致癌物[2]。

未污染海洋中砷含量一般为1-2μg/l且变化很小，其形态以无机砷(as(v)、as(Ⅲ))为主[3]。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究的目标通过不同p营养条件下莱茵衣藻对不同浓度的as（Ⅲ）及as（v）的毒性实验，研究莱茵衣藻在不同胞内磷含量条件下对as(Ⅴ)、 as(Ⅲ)的耐性影响程度。

2.研究内容研究不同磷水平下莱茵衣藻不同形态、浓度砷处理下，莱茵衣藻的生物量和生长动态的影响，计算各处理下莱茵衣藻的毒理学指标：半数效应浓度（ec50），同时检测不同p水平下莱茵衣藻在不同浓度不同形态as处理下的胞内p含量，并分析莱茵衣藻对不同形态砷的敏感性及耐受性，从而探究莱茵衣藻胞内磷含量对砷耐性的影响。

3.拟解决的关键问题在不同p水平下，测定莱茵衣藻胞内p含量，结合莱茵衣藻的毒理学指标：半数效应浓度（ec50），确定莱茵衣藻对不同形态砷的敏感性及耐性。

3. 研究的方法与方案

1 研究方法及实验方案1.1 莱茵衣藻培养条件培养基采用tap培养基，ph为7.0，在121℃下灭菌30min；培养条件：25℃；光照强度为2000 lux，且维持光暗比（12h：12h）；且在藻种传代扩增及培养过程中均保证无菌操作。

1.2 莱茵衣藻的无菌纯化采用抗生素和平板划线结合方法除菌。

使用氨苄青霉素、庆大霉素、硫酸链霉素、卡那霉素去除带菌莱茵衣藻培养液中的细菌，将四种抗生素配置成母液，使用0.2um滤膜过滤去除细菌。

4. 研究创新点

因为目前对微藻胞內磷对砷毒性的影响的研究比较少，很少有研究同时考虑到P和As同时微藻生物量的影响。

且P和As属于同族元素，因此,细胞内外的磷酸盐可以从多方面对iAs(Ⅴ)的毒性产生影响,然而科学界对这一论断并没有达成共识。

5. 研究计划与进展

2015.062015.09查阅相关文献，了解相关背景资料2015.102015.11设计实验方案，培养扩增莱茵衣藻2015.122016.01莱茵衣藻无菌纯化技术及毒性实验2016.022016.03莱茵衣藻胞内P测定2016.042016.05整理数据，撰写毕业论文2016.06毕业答辩