C端融合带电荷氨基酸对铁蛋白可溶性表达的影响开题报告

1. 研究目的与意义

蛋白外壳由 24 个铁蛋白亚基自组装而成，其中每 3 个亚基组成一个三聚体亚单位，8 个三聚体再组装成一个外径 12 nm，内径 8 nm 的球形空心纳米笼状结构。我们要分别在其c端融合9个带正电谷氨酸和9个带负电精氨酸，以研究其对铁蛋白可溶性的影响。

研究内容：

1. 铁蛋白c端融合带电荷氨基酸的质粒构建；

2. 国内外研究现状分析

铁蛋白在基因研究、与疾病的关系、生物反应器、分离与纯化、含量测定方法、铁释放动力学、纳米材料和抗体制备等方面都有了很大的进展。其中，在铁蛋白生理功能和铁代谢途径方面的研究获得一系列具有科学价值的理论和应用成果，在蛋白壳的结构方面更为显著。

1.植物铁蛋白基因研究

在以谷物等食物为主要来源的发展中国家人们存在着严重的缺铁问题.近年来铁蛋白基因作为提高植物铁含量的候选基因而倍受关注。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：

1.铁蛋白c端融合带电荷氨基酸的质粒构建：构建两个pet-20b( )重组质粒,在c端分别加9个谷氨酸，和9个精氨酸。

2.c端融合带电荷氨基酸的铁蛋白表达纯化：铁蛋白的表达；分别用16℃、20℃、25℃、30℃、37℃不同温度条件优化；分别用0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mmol/l不同iptg诱导剂浓度条件优化；分别以0.4、0.6、0.8、1.0不同od600值优化；分别用3h、6h、9h、12h、24h不同诱导时间条件优化;最终确定其最优表达条件。

4. 研究创新点

铁蛋白是广泛存在于生物体的铁贮藏蛋白,具有调节铁代谢平衡、抗氧化胁迫、消除部分重金属和有毒分子的毒害等功能.本次实验在铁蛋白的C端分别融合9个带电谷氨酸和9个精氨酸，以改善铁蛋白的可溶性。