生物荧光技术对毕赤酵母细胞中基因表达的研究开题报告

 2021-08-08 14:10:52

1. 研究目的与意义

本研究拟采用免疫荧光手段对毕赤酵母细胞表面展示的功能蛋白进行亚细胞定位，从而对展示蛋白进行免疫型定性，并且通过流式细胞技术对细胞展示效率进行定量考查，进一步优化毕赤酵母表达系统，提高及表达效率性和稳定性，为进一步探索全细胞生物催化在工业上应用打下较好基础。

2. 国内外研究现状分析

由于酵母展示的蛋白质是紧密锚固在细胞壁上 , 可以耐受 SDS 等的抽提. 同时酵母有发酵特性 , 生长快 , 因此在工业上具有很好的应用前景.例如 , 将不同特异的金属结合蛋白表达在酵母表面 , 产生的环境进化微生物 , 可用于废水处理中吸附金属离子和放射性物质将具有催化活性的酶固定在酵母细胞壁上 , 可防止酶的不可逆抑制 , 再生酶的活性表面展示技术日新月异 , 酵母展示系统也在不断地完善和改进 , 在多个领域得到广泛应用. 由于其是真核细胞展示系统 , 对于哺乳动物蛋白质 , 尤其是人的蛋白质的展示具有独特的优越性 , 相信随着此技术的不断完善 , 在蛋白质分子的研究方面会发挥越来越重要的作用.

3. 研究的基本内容与计划

丁香园电子期刊

2003

年

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4. 研究创新点

近１０年来酵母细胞表面工程在蛋白质工程中的应用得到迅猛发展。

对这项技术的发展和完善，包括开发更多的具有固定和展示功能的细胞壁甘露糖蛋白；开发新的展示蛋白系统如毕赤酵母表达系统发展人细胞表面展示系统解决酵母和哺乳动物的糖基化不同的问题进一步提高现有展示蛋白的特异性、稳定性、表达量和活性；表达更多种类的蛋白；建立更多筛选表达文库的新技术；克服扩大培养和生产过程中的难题将此项技术投入商业工业化生产。

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