一种来源于Thermotoga thermarum DSM 5069的新型酯酶的分离、纯化和性质研究开题报告

1. 研究目的与意义

酯酶是一种水解酶，催化酯水解的酶总称。狭义的酯酶也有指水解低级脂肪酸酯的脂肪酶。再者蛋白酶催化氨基酸等的酯水解反应时，也具有酯酶作用。根据反应条件不同反应也可逆行，但在生理上是向分解方向进行的。可在水分子的参与下，经由水解作用，将酯类切割成酸类与醇类。此类酶参与多种生物化学反应，依其专属受质、蛋白质结构，以及功能而有不同。

2. 国内外研究现状分析

国内已开展了DSM5069的研究,但尚未见到嗜热菌耐热酯酶的研究报道，还不能满足应用的需要。

国外已有很多不同来源酯酶DSM5069基因克隆和表达的报导，但是国内有关酯酶DSM5069基因克隆和表达方面的报导很少

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：dsm5069基因组通过pcr克隆出酯酶771的基因片段，通过连接酶在pet20b载体进行重组质粒，通过热及大肠杆菌bl21,由zptg诱导剂诱导产酶，经超声波破碎获得酶液，并进行一系列的酶学性质研究：最适温度，最适ph值，温度稳定性，金属离子稳定性，酶促反应动力学，和比酶活。

研究计划：2014-01----2014-03（1）重组质粒载体的构建和转化（2）重组质粒在大肠杆菌中的表达

2014-04----2014-05（3）e771的分离纯化及酶学性质研究（4）e771的应用研究

4. 研究创新点

首次将来源于Thermotoga thermarum DSM 5069的新型酯酶的分离、纯化和性质研究。