1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
植物在生长发育中面临着各种环境变化，长期的进化使植物能够调整发育状态以适应外界环境。植物激素是一类重要的小分子物质，能够整合发育与环境信号，在植物的生长周期中发挥着重要的作用。其中两种控制开花和植物结构的激素系统，成花素和赤霉素，是决定植物生殖转变和生长状态、引发多次农业革命的根源。后者对许多发育过程如种子萌发、细胞生长、器官伸长、从营养生长向生殖生长的转变，以及花、种子和果实都存在调控作用。
ga在农业中具有广泛的应用价值，ga对农业最有成效的贡献是将矮化等位基因引入到主要作物中，由此引发了所谓的“绿色革命”，并导致全球小麦和水稻产量的大幅增加,在20世纪70年代的绿色革命期间，水稻和小麦的产量翻了一番，帮助养活了数十亿人。rht突变体小麦的dellas对ga引发的降解反应有抗性，而水稻grv突变体sd1等位基因减少了生物活性ga的水平，从而增加了della蛋白slr1的积累，这表明绿色革命的本质是改变ga-della信号通路及其下游的生长调控过程。
ga-della去阻遏模型是解释赤霉素信号通路的经典模型，della阻遏蛋白是植物生长发育中的抑制因子，gid1是可溶性受体，能够感知ga信号以激活gid1-della蛋白发生互作，这种互作依赖于ga途径调节。gid1将della招募至包含f-box的e3泛素化连接酶scfgid2，将della蛋白进行去泛素化修饰被26s蛋白酶体降解，。当阻遏蛋白 della 被降解以后，释放与其互作的转录因子，游离的转录因子可以结合在下游基因的启动子上，启动 ga 信号途径相关基因的表达，发挥 ga 调控植物生长发育的功能。水稻（oryza sativa）包含一个della即slr1，而拟南芥包含五个della，分别是gai，rga，rga-like1，rgl1，rgl2和rgl3，它们在抑制ga中表现出部分冗余但不同的功能。sly1和dwarf2（gid2）分别是拟南芥和水稻中f-box蛋白。
2. 研究的基本内容和问题
一、研究目标
1、筛选到一些人工合成的化学小分子或多肽在生物体内影响ga信号途径
3. 研究的方法与方案
一、研究方法
1.载体构建：利用mutiple gateway方法构建包含cluc-gid1与nluc-slr1表达盒的载体，pcr扩增利用 kod-fx 高保真 dna 聚合酶扩增目的 dna 片段，50 μl 反应体系为：2×kod buffer 25 μl，模板 1-5 μl，kod-fx 1 μl，10 μm 上下游引物各 2.5 μl，用水补齐到 50 μl。反应程序为 95℃预变性 5 min，95℃变性 30 sec、56℃退火30 sec、68℃延伸(30 sec 扩增 1 kb)，扩增 36 个循环后 68℃恒温 5 min，最后 16℃保存。
2.烟草瞬时表达：构建 n-luciferase (nluc)和 c-luciferase (cluc)载体，转化农杆菌 gv3101，28℃，200 rpm 下将农杆菌进行活化。将活化好的农杆菌按照 1:50 比例扩大培养，28℃，200 rpm 摇菌至 od600至少达到 2.0。室温 8,000 rpm 离心 10 min，收集菌体。用重悬液(10 mm mgcl2, 10 mm mes-koh ph5.7, 200 μm 乙酰丁香酮)
4. 研究创新点
特色或创新之处
1）本项目采用遗传学与分子生物学结合筛选更具有实际应用价值。
传统的思路采用生物化学的方法，解析配体的分子结构，人工设计结构以改变与受体的亲和性，在真实的植物体中未必能达到预期效果。本项目中采用遗传学与分子生物学结合的方法，进行人工合成的化学小分子或多肽的遗传筛选，结果相比于前者更具可信度，研究具有实际应用的价值。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展
2019.10-2019.11利用multisite gateway方法构建pk7m34gw作为目的质粒表达载体
2019.11-2020.1 目的质粒转入烟草，进行瞬时表达，观察ga处理与对照的gid1-rga1互作，验证载体可行性
