大豆Di19互作蛋白的筛选及功能研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.课题的意义及应用前景

大豆（glycine max）起源于中国，是最重要的豆类作物，也是世界上产量最高的油料作物和重要的蛋白质来源，在食品、药品及饲料加工、生物能源生产等方面均有重要作用。

近年来，全球性气候变化所引起的干旱发生周期缩短，程度加重，对粮食生产构成严重威胁。我国是一个干旱灾害频繁发生的国家，实际生产过程中经常季节性干旱出现频率高、地域广、持续时间长和农业用水有效性较低等问题，水资源匮乏和农业用水浪费逐步成为我国农业发展的限制因素。因此，传统的灌溉农业已不能适应水资源短缺的形式，提高作物自身的抗旱性才有可能取得抗旱上的新突破。

2. 研究的基本内容和问题

1.项目研究目标

（1）利用酵母双杂交技术筛选出与di19互作的蛋白；

（2）初步探究筛选蛋白在干旱胁迫中的作用机理。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法：

（1）利用酵母双杂交技术筛选与di19互作的蛋白；

（2）对筛选到与di19互作的蛋白进行初步功能分析。

4. 研究创新点

大豆中Di19基因已经被本实验室克隆但未做进一步研究，本项目计划筛选与大豆Di19互作的蛋白，并进行相关的初步功能分析。

本项目采用酵母双杂及生物信息学的方法，酵母双杂是成熟的互作蛋白筛选方法具有实验周期短的特点，生物信息学分析与常规的大豆转化方法相比可以避免繁琐的大豆基因功能验证的步骤。可以缩短基因的研究周期。

5. 研究计划与进展

2019年8月1日～2019年8月31日 完成文献资料查询；

2019年9月1日～2019年9月31日：对诱饵蛋白进行自激活检测和毒性检测；

2019年10月1日～2019年11月31日：对诱饵蛋白进行大豆酵母文库的筛选，并对阳性克隆进行质粒提取和测序；