sirt3在糖尿病小鼠卵子中的作用开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、本课题的意义近年来,糖尿病的发病率在全球范围内不断上升,其并发症严重影响着患者的身心健康。

随着糖尿病患者的逐年增多，糖尿病女性的不孕问题也越来越突出，糖尿病对生殖系统的影响逐渐引起学者们的关注，糖尿病可在细胞代谢中从多方面对卵母细胞产生影响。

卵母细胞是雌性生殖能力的核心，它在成熟过程中出现异常现象会导致受精失败、早期胚胎发育异常以及出生缺陷等疾病。

2. 研究的基本内容和问题

一、研究的目标1、通过免疫荧光染色和共聚焦显微镜检测来研究糖尿病小鼠的卵母细胞不同发育阶段中ros水平变化。

2、通过蛋白质印记测定sirt3含量在糖尿病小鼠卵母细胞中的表达相对于正常卵子是否发生改变。

3、将外源性myc-sirt3 mrna注射到糖尿病卵母细胞中，结合免疫荧光染色和共聚焦显微镜检测来研究sirt3过表达的影响。

3. 研究的方法与方案

一、研究方法1、采集对照组及糖尿病小鼠卵母细胞，培养后收集gv期和mⅡ期卵母细胞，并用cm-h2dcfad进行活细胞染色。

定量分析相对荧光强度。

2、通过蛋白质印记检测对照组与实验组间sirt3表达产物的区别3、将外源性myc-sirt3 mrna注射到来自糖尿病小鼠的完全生长的卵母细胞中，进行过表达实验，将pbs注射为阴性对照。

4. 研究创新点

Sirt3属于组蛋白去乙酰化酶中的一个，它在减数分裂中的作用还未见报道，本研究首次揭开Sirt3在糖尿病小鼠的卵子发育中的作用。

5. 研究计划与进展

2017年9月至2017年12月：熟练掌握小鼠卵母细胞的采集以及体外成熟培养，免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜的使用等操作技术。

2018年3月至2018年5月：完成全部主体实验。

2018年4月至2018年5月：本科生毕业论文撰写，并准备答辩等相关事宜。