鸡GR基因5UTR的克隆及其报告基因系统的构建开题报告

 2022-02-08 20:17:26

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

本课题意义:测定鸡gr 5utr的序列;阐明鸡研究gr mrna 的各种变体以及其组织特异性;探讨在应激模型下,鸡gr mrna各种变体的变化。

结果将从理论上丰富对鸡 gr 表达调控的认识,并为筛选安全有效的选择性 gr 调节剂提供线索,为预防和治疗应激导致的代谢紊乱和免疫抑制提供思路。

国内外研究概况、应用前景:在现代化集约生产中,鸡群会遭受到各种不同的因素影响,如:高温、运输、疾病以及环境等等影响从而引起应激反应。

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2. 研究的基本内容和问题

研究的目标研究皮质酮注射对鸡肝脏 gr 表达的影响;分析鸡gr mrna 5utr 的异质性以及正常状态下和皮质酮注射处理后鸡肝脏gr 5utr异质性的差异;并且阐明鸡gr mrna 变体的组织特异性。

研究结果将从理论上丰富对鸡 gr 表达调控的认识,并为筛选安全有效的选择性 gr 调节剂提供线索,为预防和治疗应激导致的代谢紊乱和免疫抑制提供思路。

研究内容(1) 通过连续注射皮质酮建立鸡在体慢性应激模型,研究皮质酮注射对鸡肝脏gr 基因表达的影响。

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3. 研究的方法与方案

研究方法1.建立鸡慢性应激模型,并研究应激对鸡肝脏gr mrna水平表达和蛋白表达的影响。

同批次孵化 300 枚如皋黄鸡(江苏地方蛋肉兼用型)种蛋,孵化 21天出雏, 饲养至 56 日龄。

从中挑选出体重相近的雄性如皋黄鸡,随机分为两组,每组12只实验组每只注射4 mg/kg剂量皮质酮(溶于酒精生理盐水),对照组每只按皮质酮浓度注射等体积酒精生理盐水。

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4. 研究创新点

特色或创新之处gr在动物应激反应中的重要性不言而喻,其表达的调控一直以来都是研究者们关注的重点。

此外,gr调节剂的筛选一直是生物医学和新药研究领域所关注的热点。

目前为止,有关gr的研究主要着重在以下两个方面一是研究gr外显子1选择性启动子活性和可变剪接的组织特异性调控,二是研究 gr 蛋白亚型的表达调控和生物学功能的差异,试图提高糖皮质激素类药物作用的特异性,降低不良的副作用。

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5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展2016.09-2016.11:完成动物饲养实验、采样,如皋黄鸡的存活率、个体体重、肝脏重等表观指标记录和血液生化指标分析。

2016.11-2016.12:检测肝脏中gr以及其他糖皮质激素代谢相关的基因的转录和翻译水平。

2016.122017.01:克隆鸡5utr序列,分析其异质性。

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