1. 研究目的与意义
一、研究背景：
毒素-抗毒素系统(toxin-antitoxin systems,ta systems)广泛存在于微生物基因组中, 通常由两个共转录的基因组成,分别是编码稳定的毒素分子(toxin)和编码不稳定的抗毒素分子(antitoxin)。ta系统最早于1983 年发现于致病性大肠杆菌的低拷贝大质粒 f质粒上,用于维持质粒的稳定，但未引起人们的重视。目前研究表明，ta系统具有多种生物学功能，可能在细菌应激应答、程序性细胞死亡、多重耐药的形成等方面有重要的作用。
多环芳烃(polycyclic aromatichydrocarbons, pahs)是在环境中广泛分布的难降解污染物。它具有致癌、致畸、致突变毒性及环境激素活性，能够通过食物链富集作用进入高等动物体内。pahs在环境中主要靠特殊微生物资源的降解作用完成自然消减。因此，联苯（bp）可被选作pahs的模式化合物来研究pahs的微生物降解过程。
2. 研究内容和预期目标
一、研究内容：
通过在菌株b6-2中失活毒素蛋白，探究该菌株对环境的适应性及对pahs的降解能力。
3. 研究的方法与步骤
| 一、实验材料： 1、培养基 LB培养基：蛋白胨1%；酵母粉0.5%；NaCl 1%；pH 7.0-7.2。 无机盐培养基：K2HPO4·3H2O0.52%；KH2PO4 0.37%；Na2SO4 0.1%；MgSO4·7H2O 0.02%；NH4Cl0.2%；微量金属盐溶液 0.5；pH 7.0，121℃灭菌。 2、酶 各种限制性内切酶和各种修饰酶等。
二、实验方法： 1、菌株制备 利用联苯（BP），经过连续富集培养，筛选出生长迅速的菌株B6-2。 2、载体构建 采用碱裂解法小量提取质粒→PCR获得目的基因→纯化→酶切→连接→转化→重组子筛选及酶切鉴定 3、双亲杂交 4、菌株降解PAHs能力考查
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4. 参考文献
[1]. overgaard m,borch j, gerdes k. relb and rele of escherichia coli, form a tight complex thatrepresses transcription via the ribbon–helix–helix motif in relb[j]. journal ofmolecular biology, 2009, 394(2):183-196.
[2]. pandey d p,gerdes k. toxin-antitoxin loci are highly abundant in free-living but lost fromhost-associated prokaryotes. [j]. nucleic acids research, 2005, 33(3):966-976.
[3]. schuster c f,bertram r. toxin-antitoxin systems are ubiquitous and versatile modulators ofprokaryotic cell fate[j]. fems microbiology letters, 2013, 340(2):73-85.
5. 计划与进度安排
一、查阅文献，写出开题报告（2022年3月15日前完成）
根据论文题目，查阅正式出版的中外学术期刊和专著，从中选择10篇以上参考文献（外文1-2篇或以上），认真阅读，深刻理解，综合分析，掌握其最新动态，参照论文设计任务书的研究内容，写出开题报告。如参考文献要列出作者姓名、论文标题、发表刊物、时间、卷（期）及起止页码。在查阅的文献中选1篇外文（5000以上外文印刷字符、文献内容要结合本研究内容）全文翻译为中文。
二、实验研究前期准备工作（2022年12月24日到2022年3月15日）
