1. 研究目的与意义
ε- 聚赖氨酸（ε-pl）是目前天然防腐剂中具有优良防腐性能和巨大商业潜力的微生物类食品防腐剂。它是由 25～30个 l- 赖氨酸残基聚合而成，具有强烈的抑菌能力，可以作为防腐剂用于食品的保鲜。ε- 聚赖氨酸的防腐的作用机理主要表现在如下 3 个方面：一是作用于细胞壁和细胞膜系统；二是作用于遗传物质或遗传微粒结构；三是作用于酶或功能蛋白
1989 年日本窒素（chisso）公司首先用生物技术方法工业生产 ε- 聚赖氨酸（目前仅有的 1 条年产 1000 吨 ε- 聚赖氨酸的生产线），并允许在日本使用，以后韩国也允许作为食品添加剂使用。2003 年 ε- 聚赖氨酸通过了美国食品和医药管理（fda）的许可（许可号：grn000135）并作为食品添加剂批准上市。2011 年我国 ε- 聚赖氨酸产量约 450 吨，销售额达到 11 亿元，创汇 3 亿美元。ε- 聚赖氨酸作为绿色功能性防腐剂在食品中添加量仅为 0.01-0.5%，1kg 食品中添加 ε- 聚赖氨酸的成本为 0.015～0.10 元人民币，这是比较经济的。另外，ε- 聚赖氨酸作为一种聚氨基酸，在医药、化工、电子材料、生物工程等领域也有良好的应用前景。
随着人们生活水平及对营养健康认识日益提高,人们意识到化学防腐剂对人体有很大危害,有时在不得不用情况下只好限制其用量。于是,生物防腐剂优点就被凸现出来,安全,有效,对人体无毒害,尤其是近几年发现。聚赖氨酸更是具有抑菌谱广, 热稳定性好,水溶性强等优点。所以研究聚赖氨酸发酵生产方法,及对其提取检测,使其产业化,具有重要现实意义和应用价值。
2. 研究内容和预期目标
主要研究内容：
本研究立足于国内外研究现状，以白色链霉菌为生产菌，对白色链霉菌进行抗性筛选及化学因子处理，使菌体在发酵时能最大限度地提高聚赖氨酸的产量，具体研究内容如下：
1） 制作不同浓度梯度的聚赖氨酸平板，观察计数平板上的菌落数，确定合适的浓度。
3. 研究的方法与步骤
1）将甘油管中保存的白色链霉菌孢子悬液接种到平板上进行活化处理，于30℃恒温培养7-10d。
2）将平板上活化后的白色链霉菌孢子扩培到斜面培养基，于30℃恒温培养7-10d，于4℃冰箱保藏备用。
3）测定链霉素、ε-聚赖氨酸的最小抑菌浓度，并测定化学因子致死率。
4. 参考文献
[1]shima s, sakai h. polylysine produced by streptomyces[j]. journal of the agricultural chemical society of japan, 1977, 41(9):1807-1809.
[2]shima s, sakai h. poly--lysine produced by streptomyces. part iii. chemical studies[j]. journal of the agricultural chemical society of japan, 2014, 45(11):2497-2502.
[3]kei k, masanobu n. promotion ofe-poly-l-lysine production by iron in kitasatospora kifunense[j]. world journal of microbiology biotechnology, 2007, 23(7):1033-1036.
5. 计划与进度安排
1）2018-12-25～2019-03-23：查阅资料撰写开题报告；
2）2019-03-24～2019-04-07：斜面培养基制备与菌种的活化；
3）2019-04-08～2019-04-23：测定链霉素、ε-聚赖氨酸的最小抑菌浓度，并测定化学因子致死率。
