1. 研究目的与意义
含硫氨基酸主要包括甲硫氨酸(met)、半胱氨酸(cys)等,是合成蛋白质的一种重要的氨基酸,甲硫氨酸是人体和单瘤胃动物所必需氨基酸之一,它在水稻、小麦、大麦、荞麦,尤其在豆类、花生等主要粮食作物和经济作物中含量极低,是主要的限制性氨基酸,因此提高这些作物的甲硫氨酸含量具有极其重要的意义。
百脉根(lotus corniculatus l.)是豆科百脉根属多年生牧草,又名牛角花、五叶草,蝶形花科多年生草本植物,产于欧亚温暖地区,目前在世界各地广泛种植,我国华东、华中、西南及西北均有分布。该牧草营养丰富,耐寒、抗旱、耐涝、虫害少,花量大、自交结实、种子结实率高,较易得到稳定遗传的后代;其细胞再生性在豆科牧草中是最好的,遗传转化效率相对较高,且转基因植株生长速度快。因此,百脉根是研究外源基因转化、生物固氮机理、牧草品质改良的豆科模式植物。尽管有许多优点,百脉根作为豆科植物,尽管其蛋白质含量特别丰富,但是甲硫氨酸含量较少,而甲硫氨酸中含有的硫元素是仅次于氮、磷、钾的植物必需的第4大营养元素,缺硫时蛋白质合成受阻,使得非蛋白氮累积,不仅导致作物的生长受阻,而且降低农产品品质。大多数百脉根栽培品种苗期生长缓慢、抗逆性差,这给产业化生产带来许多不便。因此,在常规育种的基础上,利用生物技术对其加以遗传改良,以培育出优质、高产的新品种,对改良和利用我国大面积的盐碱地和荒漠化土地具有重要意义。
至今已对百脉根子叶,子叶节,上胚轴,茎尖和未成熟种子的子叶及茎尖等不定芽器官发生再生系统进行了研究。子叶节具有取材不受季节限制,诱导率高,组培成苗时间短,不易发生变异。遗传稳定性好等优点,是目前被认为用于百脉根遗传转化的比较理想的外植体。
2. 研究内容和预期目标
本课题题目为《百脉根整个子叶节再生体系的优化》,是对子叶节再生进行的研究。主要研究内容如下:
1、百脉根整个子叶节的最佳芽诱导条件的确定,
2.百脉根整个子叶节的最佳生根条件的确定,
3. 研究的方法与步骤
研究步骤:
1、取一定量百脉根00014、00015、00016和00420种子,用75%乙醇浸泡消毒1 min,无菌水冲洗1次,然后用0.1%升汞浸泡灭菌10 min,在超净工作台上,无菌条件下,用无菌水冲洗2-3次,滤纸吸干后接种于msb5萌发培养基, 25℃恒温培养箱中培养7天。计算萌发率。
2、超净台上,在无菌条件下,取出四种品种萌发的种子,置于培养皿中,除去顶芽及腋芽,保留0.5cm左右根茎,在根尖上用刀片横着压切三刀,然后将其放在共培养基上培养3天。
4. 参考文献
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5. 计划与进度安排
1、2022年3月13日~2022年3月27日,接受任务、查阅和翻译文献,撰写开题报告;
2、2022年3月28日-2022年4月3日,完成实验前准备工作,配制各实验所需药品。
3、2022年3月24日~2022年4月30日,正交法确定百脉根整个子叶节的最佳芽诱导条件。
