1. 研究目的与意义
苜蓿是苜蓿属(medicago)植物的通称,俗称金花菜。是一种多年生开花植物。其中最著名的是作为牧草的紫花苜蓿(medicagosativa)。紫花苜蓿原产伊朗,是当今世界分布最广的栽培牧草,在我国已有两千多年的栽培历史,主要产区在西北、华北、东北、江淮流域。苜蓿种类繁多,多是野生的草本植物。中国产的苜蓿主要有三种。营养价值很高,具有清脾胃、利大小肠、下膀胱结石的功效。苜蓿含有最丰富的维他命k,成分之高,驾乎一切蔬菜之上。其他如维他命c、b也相当丰富。是牲畜饲料。
紫花苜蓿(medicagosativa)是世界上最先栽培、分布最广、最为重要的一种多年生优质豆科牧草。紫花苜蓿作为豆科植物,其蛋白质含量特别丰富。全世界栽培的紫花苜蓿品种有600多种,种植面积约3500万公顷,年产值100多亿美元。紫花苜蓿在我国已有两千多年的栽培历史,全国各地都种植有紫花苜蓿,主要分布于西北和华北地区,种植面积约133万公顷[4]。紫花苜蓿具有饲用价值高、蛋白质含量高(占干物质的20%左右)[5]以及在生长期间不需要施用大量氮肥,一次种植多年收获和高产、稳产、易栽培、适口性好等优点,因此较之其它豆科牧草,无论是紫花苜蓿的产量还是它的营养价值均居牧草之首,因而是最具经济价值和营养价值的牧草之一,素有牧草之王的美誉。紫花苜蓿是一种极好的饲料作物,是极其适合用于豢养家畜的优质蛋白质饲料,这对由于使用动物性蛋白质饲料而导致的疯牛病蔓延的严峻形势,显得极其重要。紫花苜蓿的染色体基数为x=8,核基因组小,其中36%的碱基为单一序列,在倍性水平上可以随意操作,因此已成为在分子水平上研究植物发育的模式植物之一[6]。紫花苜蓿还被认为是最有可能生产重组分子的植物体系,因而转基因紫花苜蓿除了可以为动物供给优质健康的饲料外,还将成为大批量生产目的化合物的生物反应器,并且具有加工成保健品、食品添加剂及生物药剂生产原料的潜力。紫花苜蓿还具有根系发达的特点和生物固氮的能力,大量种植紫花苜蓿对改善土壤结构、提高土壤养分、防止水土流失和土地沙荒化具有积极的意义。
尽管紫花苜蓿的优点很多,但是也存在抗逆性差、病虫害严重、及木质素含量高,反刍动物大量采食易得臌胀病等不足,还存在豆科植物都有的营养缺陷,即缺少甲硫氨酸。因此本文则通过筛选出合适的紫花苜蓿生长体系,再由不同农杆菌侵染对大豆整个子叶节芽诱导的影响,为后续利用带有高蛋氨酸的农杆菌侵染,并诱导再分化为转高蛋氨酸蛋白基因的紫花苜蓿新品种。
2. 研究内容和预期目标
本课题题目为《苜蓿整个子叶节再生体系的优化》,是对子叶节再生进行的研究。主要研究内容如下:
1.苜蓿整个子叶节的最佳芽诱导条件的确定
2.苜蓿整个子叶节的最佳生根条件的确定
3. 研究的方法与步骤
研究步骤:
1、取一定量紫花苜蓿m1,m2等品种的种子,用75%乙醇浸泡消毒1min,然后用0.1%升汞浸泡灭菌10min,在超净工作台上,无菌条件下,用无菌水冲洗3-5次,滤纸吸干后接种于msb5培养基,25℃恒温培养箱中培养7天。计算萌发率。
2、在超净台上,无菌条件下,取出萌发的种子,剥去种皮,保留2-3mm下胚轴,将子叶从下胚轴处切开,除去顶芽及腋芽,将其放在共培养基上培养3天。
4. 参考文献
[1]黄文惠,刘自学,耿华珠.概论苜蓿的分布和发展[j].中国苜蓿,1995,7
[2]耿华珠,吴永敷,曹致中.中国苜蓿[m].北京:中国农业出版社,1995
[3]王强龙,王锁民,张金林,等.根癌农杆菌介导atnhx1基因转化紫花苜蓿的研究[j].草业科学,2007,23(12):55-59
5. 计划与进度安排
1、2022年3月13日~2022年3月27日,接受任务、查阅和翻译文献,撰写开题报告;
2、2022年3月28日-2022年4月3日,完成实验前准备工作,配制各实验所需药品。
3、2022年3月24日~2022年4月30日,正交法确定苜蓿整个子叶节的最佳芽诱导条件。
