1. 研究目的与意义
1.1背景和目的ε-聚赖氨酸(ε-poly-lysine,ε-pl)是由日本学者s.shima和h.sakai[1]发现的。
ε-聚赖氨酸在高温的条件下依旧能够保持不变性,ε-聚赖氨酸水溶液在100℃加热30分钟后依旧不会发生分解。
他的聚合物长度依旧能够保持原样。
2. 研究内容和预期目标
主要研究内容:本研究立足于国内外研究现状,在生物分离技术、生物生化技术等多学科基础上,利用预处理(离心)、热处理、酸处理,来去除发酵液中的各种杂蛋白,并通过阳离子交换树脂对发酵液中ε-pl进行提取,以最大限度的从白色链霉菌发酵液中提取纯化ε-pl。
具体研究内容如下:1)研究经过预处理(离心)、热处理、酸处理、离子交换后发酵液中蛋白质含量、ε-pl的含量等指标,与原始发酵液进行对比。
2)利用正交试验,对热处理的初始ph(4.0、5.0、6.0、7.0、8.0)、处理温度(60℃、70℃、80℃、90℃、100℃)、处理时间(15min、30min、45min、60min、75min)进行优化,通过处理后发酵液中蛋白质含量和ε-pl含量变化,经过正交分析,从而确定热处理的初始ph、处理温度和处理时间。
3. 研究的方法与步骤
3.1 主要研究方法:提取分离。
3.2 发酵工艺流程:发酵液预处理(离心)→热处理→有机溶剂处理→离子交换→数据分析3.4 实验方法:(1)热处理:将发酵液置于不同温度下加热,使得蛋白质变性沉淀,离心去除(2)有机溶剂处理:利用蛋白质遇有机溶剂变性的原理去除蛋白。
(3)离子交换法:利用聚赖氨酸带正电的特性,采用弱酸型阳离子交换树脂,使聚赖氨酸吸附在树脂上,从而达到分离聚赖氨酸的目的。
4. 参考文献
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5. 计划与进度安排
1)2022-03-04~2022-03-10:查阅资料撰写开题报告;2)2022-03-11~2022-03-13:白色链霉菌发酵液的预处理;3)2022-03-14~2022-03-21:正交实验确定热处理的处理条件;4)2022-03-21~2022-03-24:酸处理的单因素实验;5)2022-03-25~2022-03-30:阳离子交换树脂的预处理;6)2022-04-01~2022-04-20:提取纯化工艺的响应面实验;7)2022-04-21~2022-05-03:不同培养基条件下白色链霉菌发酵液的提取实验;8)2022-05-05~2022-05-19:不同培养基条件下提取的ε-聚赖氨酸的对比实验;9)2022-05-20~2022-05-28:补充实验,整理试验数据和结果,撰写论文;10)2022-05-28~:修改补充论文,准备答辩
