1. 研究目的与意义
1.研究背景
随着化学工业的快速发展,化学农药已经在农业中得到广泛应用。但是传统化学农药的大规模应用在为农业生产带来飞速发展的同时,也对生态环境和人类健康产生了巨大影响。化学农药的长期使用在杀伤害虫天敌的同时,也使得害虫的抗药性普遍提高,化学农药的残留问题更是对环境造成了严重的污染。2019年中共中央、国务院发文明确,5年内淘汰现存的氯化苦、磷化铝等高毒农药。国家大力鼓励并出台政策支持“绿色、无污染、健康”的新型生物农药的研发和推广。为此,我国对生物农药的研发也日益壮大,生物源农药也取得了长足进步,特别是杀虫抗生素已成为杀虫剂中的“黑马”,备受关注。多杀菌素是20世纪90年代初由陶氏益农公司开发的一种大环内酯类杀虫抗生素,在防治农林害虫虫、储粮害虫、卫生害虫以及牲畜寄生虫上面发挥着重要作用。
2.研究目的
2. 研究内容和预期目标
1.研究内容
本研究立足于国内外研究现状,以刺糖多孢菌为生产菌,设置不同常压室温等离子体诱变处理剂量,确定等离子体对刺糖多孢菌的最适诱变剂量,得到刺糖多孢菌等离子体诱变高产突变菌株,以及对等离子体诱变突变菌株发酵性能进行对比研究,具体研究内容如下:
1)将实验室甘油管保存的刺糖多孢菌株进行稀释涂平板,进行活化,于30℃恒温培养7-10天,高效液相色谱法筛选最高产菌株作为后期实验出发菌株。
3. 研究的方法与步骤
1.培养方法
(1)平板和斜面培养:无菌环取甘油管保存的刺糖多孢菌接种在平板或斜面上,然后放置在28℃恒温培养箱中,培养7-10d。
(2)种子培养:取培养成熟的新鲜斜面,在超净工作台上加入5 ml无菌生理盐水,用灭菌竹签洗下孢子,取1ml单孢子悬液加入种子培养基中,用八层纱布包好锥形瓶的瓶口并置于摇床中,200rpm,30℃恒温培养72 h。
4. 参考文献
[1]王欣荣,张爱雪,唐智超,等.产多杀菌素刺糖多孢菌的诱变选育[j].中国抗生素杂志,2020,45(09):873-877.
[2] huang k x,xia l, zhang y, et al. recent advances in the biochemistry ofspinosyns[j]. appl microbiol biotechnol, 2009, 82, 13-23.
[3] 扶教龙,徐敏强,张松,等.多杀菌素产生菌复合诱变选育及发酵培养基优化[j].中国抗生素杂志,2018,43(07):824-830.
5. 计划与进度安排
1)2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第1周(2022-12-28~2022-3-7):查阅资料,准备开题报告,外文论文翻译;菌种的活化与出发菌株的筛选。
2)第2周~第5周(2022-3-8~4-4):选取不同诱变剂量诱变处理出发菌株,确定出发菌株的最适诱变剂量,筛选培养最适诱变剂量下的突变菌株,利用高效液相色谱仪测定其产量。
3)第6周~第8周(2022-4-5~4-25):将最高突变菌株进行遗传稳定性转接培养。
