杂交鹅掌楸DELLA蛋白基因表达载体构建和功能分析开题报告

1. 研究目的与意义

研究目的：获得杂交鹅掌楸的DELLA基因植物表达载体并在拟南芥中验证该基因功能。

研究意义：DELLA蛋白作为GA信号传导途径中的主要负调控因子，同时也是整合其他植物激素或环境信号的枢纽蛋白来调节植物的生长发育过程。植物体接受GA信号后，通过泛素-蛋白酶体途径降解DELLA蛋白来解除其对生长的抑制作用。但对于木本植物DELLA蛋白的研究几乎没有开展过，本研究拟以鹅掌楸为材料，对DELLA蛋白的基因序列进行分析，构建植物表达载体并进行基因功能分析，为木本植物的DELLA蛋白的功能研究奠定基础。

2. 国内外研究现状分析

peng等提出的ga可去抑制的抑制子模型中认为，在没有ga情况下,该蛋白阻遏植物生长发育。当della蛋白上的ga信号感知区接收到ga信号后,这种蛋白的阻遏作用被解除,植株表现出正常的ga反应和生长发育。如果della结构发生改变,则不能感知ga信号，della蛋白则成为组成性的阻遏蛋白。

liu等鉴定了一种油菜(b.napus)的半矮化突变体ds-1，其中编码della蛋白的bnrga基因发生了点突变，导致della蛋白不能与ga的受体gid1互作，因此不能被降解，其c端抑制结构域的抑制作用不能被解除，因此植株矮小。

sheerin等用体内和体外方法研究了拟南芥的rgl1(一种della蛋白)与gid1a（一种ga受体）以及sly1(f-box蛋白的)之间的互作。氘交换质谱显示，在与gid1a结合之前，rgl1的整个n端结构域呈无序状态。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：

构建杂交鹅掌楸della蛋白基因过表达载体并利用拟南芥遗传转化体系进行功能分析，获得杂交鹅掌楸della蛋白基因在拟南芥中的过表达表型。

研究计划：

4. 研究创新点

目前国内外对DELLA蛋白的研究主要集中在草本植物上，对木本植物的研究很少，本研究拟以鹅掌楸为材料，对DELLA蛋白的基因序列进行分析，并进行简单的进化分析，为木本植物的DELLA功能研究奠定基础。