猪波氏杆菌的分离与鉴定开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1．意义：

猪支气管败血波氏杆菌（brodetella bronchiseptica,bb）是引起猪传染性萎缩性鼻炎（non-progressive atrophic rhinitis，npar）的重要致病因子之一。该菌可单独或和其他病原菌协同致病，其传播方式为接触或飞沫传染，单独感染时，主要侵害仔猪，可导致猪支气管败血波氏菌病，月龄内仔猪主要表现为鼻甲骨萎缩和支气管肺炎；6周后的仔猪感染主要表现为打喷嚏及鼻塞，不产生或者只产生轻度的鼻甲骨萎缩，但呈带菌状态；该菌单独感染很少引起猪只的死亡，故容易被忽视，但该菌一旦传入某猪场，短时间又很难清除，给猪场的健康生产带来极大不便，同时，该菌易与支原体、副猪嗜血杆菌、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等继发感染或混合感染，引起猪呼吸道综合征，增加猪群病死率，给养猪业带来严重的经济损失。

本课题对送检的疑似猪传染性萎缩性鼻炎患病猪的病料进行细菌培养、分离、纯化，形态学及生理生化试验、pcr检测、动物致病性试验、菌相鉴定、药敏试验等操作，最后掌握bb在发病地区流行的血清型及耐药性，为预防和控制该病提供基础资料，从而促进当地养猪业的健康生产。

2. 研究的基本内容和问题

1．研究目标：

本课题通过采集送检病料进行细菌选择培养，然后进行形态学观察、确定该菌生理生化反应条件，pcr检测、动物致病性试验、菌相鉴定、药敏试验，最终鉴定出发病地区猪支气管败血波氏杆菌的流行株血清型及耐药情况，从而为当地养猪业者提供诊断、治疗和免疫何种疫苗提供科学合理的依据。

2．研究内容：

3. 研究的方法与方案

1．研究方法：

通过设定变量进行对比试验然后对现象结果进行比对分析，从而得出结论。

2.技术路线：

4. 研究创新点

目前很多基层兽医部门和养猪场常采用猪支气管败血波氏杆菌的间接ELISA诊断法，可是影响上述ELISA诊断法的敏感性和特异性的因素很多，如包被抗原的纯度、免疫反应活性及特异性。波氏杆菌的抗原组成复杂，不同抗原在致病和免疫中的功能差异很大，因此该ELISA诊断方法反应的敏感性和特异性不能得到很好的保证。同时，该法仅限于抗体水平的诊断，既不能确定发病地区流行菌株的血清型及毒力，也不能确定其耐药性，不利于该病的预防和控制。

相对于上述ELISA诊断方法，本课题采用的生理生化试验、PCR鉴定、动物致病性试验、菌相鉴定以及药敏试验，从而确定发病地区流行菌株的血清型、毒力及耐药性情况，其中PCR鉴定对于病原菌的确诊，起到至关重要的作用，准确性极高，从而为预防和控制该菌提供科学依据。

5. 研究计划与进展

2014.2.23-3.23 查阅文献资料，准备仪器试剂，撰写开题报告

2014.3.24-4.10 进行相关实验，选择适宜的培养基分离和纯化传代疑似细菌

2014.4.11-5.15 对疑似细菌进行生理生化试验、pcr鉴定、动物致病性试验、菌相鉴定以及药敏试验