马尾松针叶总RNA的高效提取开题报告

 2021-08-08 11:04:24

1. 研究目的与意义

1.马尾松为我国南方重要的多用途树种,在经济、生态效应等方面发挥重要的作用。

2.研究马尾松总rna提取对于后续开展分子克隆研究具有重要的意义。

3.马尾松属于针叶树种,其针叶内含有大量多糖、胶质和酚类等次生物质,这些物质很容易和核酸结合,给rna的提取和分离带来很大的困难。另外,由于周围环境中rna酶无处不在,在提取的过程中很容易造成rna的降解,影响其含量。针对以上情况,国内外学者就总rna高效提取提出了很多方法。但对于不同的材料,其方法上还是会存在差异。所以对马尾松进行总rna的高效提取还是有必要的。

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2. 国内外研究现状分析

关于RNA提取研究国内外已有很多报道,特别是在作物、花卉等中有大量研究。近年随着木本植物研究的迅速发展,在越来越多的林木上开展了RNA高效提取的研究。针叶树种是木本植物中很原始的一类,由于自身的特性,使RNA提取增加了难度。国外在这方面研究较早,如Chang(1993)采用CTAB法提取松树总RNA,后面人们在此基础了又做了大量的改进,发展出了很多新的方法。目前,对于马尾松总RNA提取尚未见报道,虽然RNA提取商品化试剂盒也很多,但是方法较繁琐、成本高,针对不同树种也会有差别。本研究以确定一种适合马尾松总RNA提取的高效、经济的方法。

3. 研究的基本内容与计划

1、试验的各项准备工作。试验中用到的试剂配方及配置,仪器的规格,试验方法及具体操作过程。

2、以马尾松种子萌发的幼苗及室内组培苗为材料,采用不同方法提取总rna,比较其效果。

3、实验数据获取,包括rna浓度的测定(a260/280、a260/230、浓度),电泳检测结果分析。

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4. 研究创新点

针叶树种总RNA提取的相关研究报道较少,但马尾松总RNA提取方法的研究对于分子育种的开展具有重大意义,也为后续的cDNA文库构建奠定了基础。

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