DNA聚合酶Pfu的提取与纯化开题报告

 2021-08-08 02:00:24

全文总字数:838字

1. 研究目的与意义

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FZB42是一株遗传背景比较清晰的革兰氏阳性PGPR菌株,我们在对FZB42的前期研究中,发现了一个新的非编码型具有基因调节功能的sRNA。已知该sRNA对细菌的基因表达具有重要调节作用,但其本身的转录表达特征尚不清楚。根据生物信息学分析及其它相关证据,我们推测PhoP可能是调控该sRNA表达的转录因子。在本课题中将对phoP进行敲除研究,进而验证我们的假设。

2. 国内外研究现状分析

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FZB42是一株遗传背景比较清晰的革兰氏阳性PGPR菌株,2012年云南大学刘仲仲发表论文《解淀粉芽孢杆菌FZB42(Bacillus amyloliquefaciens FZB42)中hp基因侵染线虫的鉴定及分子机制研究》,首次揭示了解淀粉芽孢杆菌FZB42中与杀线虫相关的基因hp(RBAM_007470)在侵染线虫中的作用;首次研究并发现hp基因参与合成的噻唑/恶唑类化合物在线虫侵染中起重要的作用。2011年南开大学代森发表论文《解淀粉芽孢杆菌抑菌物质分离和调控研究》,对其抑菌产物进行分离鉴定,具有十分重要的应用价值。

3. 研究的基本内容与计划

(1)2017.2.22―2017.2.29:阅读文献。熟悉掌握以下概念,基本操作流程,和研究意义:解淀粉芽孢杆菌,重叠pcr,基因敲除。

(2)2017.3.1―2017.5.15:完成基因phop对解淀粉芽孢杆菌srna bas01产生影响的测试,完成phop的缺失突变株构建。

(3)2017.5.16―2017.5.31:整理试验数据,撰写毕业论文,准备答辩。

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4. 研究创新点

利用重叠延伸PCR技术,此技术利用PCR技术能够在体外进行有效的基因重组,而且不需要内切酶消化和连接酶处理,可利用这一技术很快获得其它依靠限制性内切酶消化的方法难以得到的产物。

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