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1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.沙雷氏菌
沙雷氏菌(serratia sp.)是自然界中常见的兼性厌氧菌,属于革兰氏阴性菌。它是水和土壤中的常居菌群,也是临床上的条件致病菌,可引起肺部感染等疾病。沙雷氏菌能产生多种胞外酶,在农业、工业和医药中都有重要应用。粘质沙雷氏菌fs14是本实验室前期从白术茎秆中分离得到的一株可以分泌耐高温dna酶和蛋白水解酶的菌株[1]
2.酰基转移酶
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2. 研究的基本内容和问题
研究的目标:
表达纯化沙雷氏菌中的两个酰基转移酶(10160)和(09570),并对其进行结晶条件筛选;
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3. 研究的方法与方案
研究方法:
pcr用于扩增目的dna;
限制性内切酶及连接酶用于构建含目的基因的报告基因载体;
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4. 研究创新点
特色或创新之处:
本实验对象选取沙雷氏菌里的两个酰基转移酶,通过克隆得到含有该酰基转移酶的大肠杆菌C43菌株,通过异源表达获得目的蛋白后初步探究其结晶条件,为晶体学结构研究奠定基础。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展:
2018年2月-2018年4月,查阅资料、文献;学习和熟悉基本实验操作。
2018年5月-2018年7月,酰基转移酶(10160)和(09570)基因的过表达。
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