用酵母双杂交探讨SNARE蛋白Bos1和Sed5与细胞自噬蛋白间的互作关系开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1．课题的意义

细胞自噬是依赖细胞内溶酶体（酵母中为液泡）介导的一种胞内物质降解途径，它在真核生物体中普遍存在且高度保守。细胞内非正常折叠的蛋白质及受损的细胞器等通过细胞自噬途径降解用于新物质的合成，形成保持细胞正常运转的动态平衡(suzukiandohsumi2007)，进而影响生物体的生理及病理过程。如植物中细胞自噬参与生长、发育、衰老、植物免疫反应以及对生物和非生物胁迫等应答过程(seayetal.2006;haywardetal.2009;lenzetal.2011;liuandbassham2012)；动物中细胞自噬涉及免疫反应、肿瘤形成、神经退行性疾病及衰老等过程(cecconiandlevine2008;mizushimaetal.2008;munz2010)。然而目前对细胞自噬的了解仍然非常有限，深度阐明细胞自噬的调控机理具有重要的理论意义与应用价值。

2．国内外研究概况

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题

1、课题研究目标

利用酵母双杂交技术对snare蛋白bos1和sed5与细胞自噬蛋白之间物理互作进行探讨。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法与实验方案

1.1扩增目的基因全长序列

利用pcr扩增技术扩增目的基因bos1和sed5的orf序列。

4. 研究创新点

特色或创新之处

SNARE蛋白Bos1与Sed5参与COPII囊泡与高尔基体的融合，而本实验室前期工作发现Bos1与Sed5也参与细胞自噬运输，但它们参与细胞自噬的分子机制并不清楚，本课题通过酵母双杂交技术检测Bos1与Sed5与细胞自噬相关蛋白之间可能存在的物理互作关系，这对阐明Bos1与Sed5调控细胞自噬的分子机制提供坚实的基础。

5. 研究计划与进展

本课题计划于2月下旬开始

第一阶段：预计2周

内容：完成目标基因片段的扩增以及载体的构建