S1菌株对崇明拟异小杆线虫生长发育的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

昆虫病原线虫(entomopathogenic nematode，简称epn)指以昆虫为寄主的致病性线虫。它可使被寄生的昆虫生长发育不良、生殖力减退、畸形或死亡。昆虫病原线虫共生菌属于革兰氏阴性菌，肠杆菌科(enterobacteriaceae) 。寄生于昆虫病原线虫肠道内，二者互惠共生。目前研究的共生菌主要有两个属，异杆菌属(xenhabdus)和发光杆菌属(phothabdus),其中, 异杆菌属与斯氏属线虫(steinernema)共生, 发光杆菌属与异小杆属线虫(heterhabditis)共生。由于昆虫病原线虫具有安全无毒，使用方便等优点，在害虫的可持续防治方面有较大潜力。昆虫病原线虫共生菌的一些代谢产物不仅可以产生一些次生代谢产物，如杀虫蛋白、抑菌物质、抗癌物质、胞外酶、胞内晶体蛋白、色素及荧光素等，还会影响线虫本身的生长发育。

二十世纪 60 年代，我国中国科学院动物研究所首次从捷克引入epn。随后对线虫繁殖方法、杀虫方法、治病范围等方面进行了大量的研究、目前，已有关于应用epn防治农业害虫的报道，且防治率十分可观。随着人们对昆虫病原线虫的进一步研究，昆虫病原线虫在防治害虫方面的应用越来越多，其环保、方便、快捷等优点让更多人瞩目昆虫病原线虫的应用价值。而epn的推广也将对农业害虫防治有重要意义。

参考文献：

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

通过研究s1发酵液对拟异小杆线虫生长发育的影响，进而探讨s1菌株与异小杆线虫生长发育的关系。

研究内容：

3. 研究的方法与方案

1、提取无菌线虫

收集dz怀卵大母虫于无菌的1.5ml离心管中，用无菌的线虫生理盐水（0.85氯化钠）清洗3次，加入0.2硫柳汞液，暗处静置消毒30min；用无菌的线虫生理盐水清洗3次，加入2.5naclo和0.2m naoh混合液，剧烈震荡裂解怀卵大母虫，释放卵；8000r离心2min，卵沉于管底；用灭过菌的线虫生理盐水清洗两次，（用0.2硫柳汞液清洗1次，进行第3次消毒（以具体情况而定））；用无菌的线虫生理盐水清洗2次，用封口膜封紧离心管管口保持卵无菌，待用；

2、制作s1菌种发酵液

4. 研究创新点

研究共生菌发酵液对线虫生长发育的影响，期望发掘出共生菌中影响线虫生长发育的活性成分。

5. 研究计划与进展

2015.10-2015.11 查阅资料，整理实验思路，准备实验器材

2015.11-2015.12 学习熟悉试验方法，分析结果，总结经验