1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
凝乳酶是制作干酪中使牛奶凝固的重要酶制剂,随着人们生活水平的提高和健康意识
的增强,奶酪受到越来越多消费者的喜爱,因此凝乳酶的需求量也日趋增加。获得凝乳酶
的传统方法是从动植物中提取,但该来源受多方面因素的限制。利用基因工程生产的凝乳
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2. 研究的基本内容和问题
本研究主要是想筛选出一株能够产具有良好凝乳作用的凝乳酶的优良菌株,并通过形态观察、环境因素影响的测定、生长特征、生理生化指标测定和16SrRNA寡核苷酸序列测定对该菌株进行鉴定,扩大产凝乳酶的可选菌种,同时对影响菌株的营养条件、培养环境等因素、细菌凝乳酶的酶学性质进行探讨,希望为该菌种的工业化应用打下基础。
如何筛选好芽孢杆菌,和产凝乳酶的芽孢杆菌。特别是土壤分菌。
3. 研究的方法与方案
运用功能培养基分离产凝乳酶的菌株,通过液体培养扩大菌株,利用摇瓶培养确定环境影响因素的测定,并观察生长特性,同时测量生理生化指标。
通过16SrRNA寡核苷酸序列测定鉴定菌株。
4. 研究创新点
因为现阶段凝乳酶的生产需求不断增大,国内相关产品生产利用的多为霉菌,在工厂规模下的发酵罐生产霉菌有着诸多不便,而国外老式凝乳酶利用杀小牛从牛胃提取的方法已经不适应现阶段的供需要求。因此研究芽孢杆菌这种易于操作、可大规模液体发酵并且现阶段生产中无高产菌种的细菌便是一种具有创新意义的研究。
5. 研究计划与进展
计划分为三个阶段,第一个阶段分离菌株大概用时一个礼;第二阶段保存并检测各个菌株的酶活力,同时扩大培养高活力的菌株,同时鉴定其生理生化最适环境;第三个阶段,利用16sRDNA鉴定高产菌株,同时尝试诱变该菌株。
预期可以分离到产凝乳酶的芽孢杆菌,但是相对活力可能有限,通过生理生化最适环境可能有限提高产酶量,诱变有可能得到高产菌株。
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