PA蛋白多克隆抗体的制备开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

获得PA蛋白的多克隆抗体，可用于含有PA蛋白的融合蛋白的提取、纯化、检测和定量等。

PA蛋白是乳酸乳球菌自溶素酶AcmAC-端的一个蛋白结构域。AcmA是一种肽聚糖水解酶，主要与细胞分离和稳定期细胞消融有关，而其C-端的PA蛋白结构域包含三个被隔开的高度同源的45个氨基酸残基的重复序列，能够特异性识别并结合GEM颗粒（GEM是将乳酸菌经热酸处理、去除细菌原有蛋白质和核酸等大分子物质后获得的细胞壁肽聚糖骨架）。借助此特性荷兰科学家TjibbeBosma建立了乳球菌外壳-蛋白锚钩递送系统（也称为革兰氏阳性增强基-蛋白锚钩系统，Gram-positiveEnhancerMatrix-PA，GEM-PA），该系统将外源蛋白与PA融合表达从而实现外源蛋白的纯化浓缩，该系统在疫苗、医药、生物催化剂和全细胞生物酶展示等领域研究、应用广泛。

2. 研究的基本内容和问题

研究目的：

获得可溶性pa蛋白及其抗体

研究内容：

3. 研究的方法与方案

研究方法：

利用原核表达出的pa蛋白经过纯化、浓缩后去免疫家兔，进过多次免疫后，获取抗体，并对抗体进行检测

技术路线：

4. 研究创新点

PA蛋白的可溶性表达及纯化

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展：

3月1日3月6日：pa蛋白的原核表达及纯化

3月7日：一免