1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
人参( panax ginseng c. a. meyer) 为五加科多年生草本植物, 中国古老的关于中药的药学典籍神农本草经6把人参列为上品, 言其主补五脏, 安精神,定魂魄,止惊,明目,开心益智, 久服有轻身延年之功效。人参味甘、微苦、性温, 素有百草药之美称。应用于中医已有两千多年的历史,由于其具有广泛的药理作用和医疗用途, 因而受到国内外众多学者的重视。人参的化学成分包括人参皂甙( ginsenosides, ginseng saponins) 、人参多糖( ginsengpolysaccharides) 和多种活性肽等, 其中人参皂甙为人参最重要的有效成分。随着对人参化学成分及药理研究的为速发展, .对人参花的开发研究也取得很大进展。近些年的研究过程中,医学界证实,人参花也具有非常重要的药用价值。人参花中人参总皂甙的含量是人参根的5倍以上,其中,可提高免疫力,抑制癌细胞成长的人参皂甙rd是人参根的13.85倍,保护细胞膜防止细胞老化的人参皂甙re含量是人参根的14.7倍,而且导致上火的ro含量较少。其还含有独特的人参花蕾9肽和人参花蕾11肽、大量的微量元素以及少量的寡糖。
目前国内外对人参皂甙的研究主要集中在其对中枢神经系统、心血管系统、血液系统等的保护作用, 及其抗肿瘤的功效方面。但目前的研究多局限于动物实验,要将其药理作用广泛应用于临床疾病治疗, 尚需大量三期临床试验。
现代医学则证实肿瘤形成的主要原因之一是机体免疫功能低下。中药能显著提高和调节恶性肿瘤患者的免疫功能,特别是对细胞免疫功能的调节,表明中药在防治肿瘤发生方面具有一定潜力。从中药中发现更为理想的免疫调节剂和抗肿瘤药物,用于免疫性疾病和肿瘤等的防治,推动中医药的发展。并且可以减少服用抗癌药物对身体毒副作用的影响,以天然安全的方式治疗癌症。国内外研究人员对人参进行了大量实验研究,对人参的药理作用进行了较为详细的研究,并通过研究人参与机体相互作用及其规律,充分地证实了人参治疗疾病的良好功效。人参对于人体的神经系统以及心脑血管系统和都有很好的作用,同时抗肿瘤也有很好的增效作用其是在血液和造血系统有很好的改善作用,并对于免疫系统的以及内分泌系统均有着积极作用,人参对其他疾病仍有许多改善作用。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:本实验主要是通过对不同肿瘤细胞体外传代培养,研究不同浓度的人参花皂甙对肿瘤细胞活性影响。
研究内容:分别对amm.bgc,mcf.hela.hgc,heph2肿瘤细胞进行三次体外传代培养,把样品人参皂甙rb1、rc、rd、rg1、re分别配成一系列浓度梯度的溶液,肿瘤细胞在96孔板进行点板培养24,48,72小时,加样后继续培养,终止试验并染色用酶标反应仪器测并计算样品对不同肿瘤细胞的抑制率。
拟解决的关键问题:肿瘤细胞的选择,细胞培养容易死亡问题,消化程度的控制,污染问题,样品溶液的配制,浓度梯度的选择,点板时的精确度以及污染,培养时间的选择
3. 研究的方法与方案
1.分别将amm、bgc、mcf、hela、hgc、heph2细胞解冻,37℃、5%co2,饱和湿度的培养箱中培养
2.当细胞长满瓶壁的80%以上即可传代
3.细胞计数
4. 研究创新点
现代医学则证实肿瘤形成的主要原因之一是机体免疫功能低下。中药能显著提高和调节恶性肿瘤患者的免疫功能,特别是对细胞免疫功能的调节,从而达到延长生存期,改善生活质量的目的许多研究结果显示,中药可促进免疫器官的发育,提高机体的免疫力,并通过激活单核一巨噬细胞和天然杀伤细胞、促进T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖、分化和免疫球蛋白的产生,增强机体的免疫力;中药的活性成分有降低肿瘤细胞端粒酶活性的作用,表明中药在防治肿发生方面具有一定潜力。了解中药的免疫机理,可从中药中发现更为理想的免疫调节剂和抗肿瘤药物,用于免疫性疾病和肿瘤等的防治,推动中医药的发展。并且可以减少服用抗癌药物对身体毒副作用的影响,以天然安全的方式治疗癌症。
人参是我国传统医食两用的养生珍品, 其主要功效成分人参皂甙也受到越来越多学者的关注和重视。对人参皂甙的研究主要集中在其对中枢神经系统、心血管系统、血液系统等的保护作用, 及其抗肿瘤的功效方面。但目前的研究多局限于动物实验,本次试验主要针对人参花皂甙在体外条件下对人体多种肿瘤细胞的作用。这对于人参花皂甙的临床疾病治疗有很大的参考价值。
5. 研究计划与进展
预期进展:整个实验大概需要两个月时间,从2014年1月开始,一月份主要查阅相关文献资料,了解实验原理、方法步骤以及预备有关实验用品。二月份主要是培养并传代肿瘤细胞,探索合适的实验条件,配制溶液,确定样品的浓度梯度,三月初开始点板,加样,根据实验结果计算出抑制率,若是与预期结果相差较大还需要重复实验。
2014年1月2014年2月 文献查询和开题报告的撰写
2014年3月2014年4月 实验开展
