1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
昆虫病原线虫 (entomopathogenic nematodes)、bt毒素、白僵菌、绿僵菌等绿色农药已被广泛应用于害虫的综合治理中, 为害虫的生态控制带来了显著的成效[。
昆虫病原线虫是近几十年发展起来的一种非常有潜力的生物防治因子。
到上世纪80年代,许多新种、新品系被开发利用,虫病原线虫作为生物杀虫剂已经广泛用于害虫的综合治理之中, 并已经实现商品化。
2. 研究的基本内容和问题
本研究利用大蜡螟幼虫诱捕线虫的方法从某地农田采集的土样中分离出一株昆虫病原线虫品系,标记为cm19。
提取cm19的基因组总dna,利用通用引物扩增其18s rdna和its序列。
序列测定后输入genbank 利用blast进行同源比对,分析结果cm19和哪一属线虫亲缘关系最近。
3. 研究的方法与方案
首先对线虫进行诱捕与分离,然后将线虫进行繁殖。
研究中所用的线虫均是在本实验室用大蜡螟幼虫进行饲养和繁殖,在铺有湿润滤纸的培养皿 中将10条大蜡螟幼虫放置在含有2000-3000 条侵染期线虫的环境中,置于25 3℃培养箱中。
大约有3-4天收集雌雄同体线虫,7-10天后收集侵染期线虫,15天后收集成虫。
4. 研究创新点
本实验是对土壤中所发现的未知线虫进行鉴定,由于土壤中的线虫种类多样,且我们对线虫的了解到目前为止还不够全面,因此本实验极有可能会发现一种新的线虫。
且昆虫病原线虫 (entomopathogenic nematodes)、bt毒素、白僵菌、绿僵菌等绿色农药已被广泛应用于害虫的综合治理中, 为害虫的生态控制带来了显著的成效。
昆虫病原线虫是近几十年发展起来的一种非常有潜力的生物防治因子。
5. 研究计划与进展
2月:联系老师,阅读文献,查找资料,线虫诱导与分离 3月:对所采集的线虫进行繁殖,在光学显微镜下对线虫的形态进行观察和测量,在扫描电镜下对线虫进行形态学观察,形态学特征数据整理 4月: 线虫18S rDNA和ITS序列的扩增, PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳纯化, DNA片段测序,序列分析和系统进化分析 ,数据分析 5月:整个实验全部数据汇总分析,查阅中英文文献,撰写论文并修改
