拟南芥ABI4基因表达载体的构建开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1. abi4转录因子的功能和研究概况

abi4(abscisic acid insensitive 4)是一种脱落酸(aba)非敏感型的转录因子，诱导一系列aba相关反应基因的表达，影响着植物的生长发育，诱导的基因功能包括种子成熟、激素应答、新陈代谢、胁迫应答、蛋白稳定、信号转导等。abi4 诱导的基因启动子多数含有abi4 特征性结合的基序，如ce1 或s box。近期对abi4 直接转录目标的研究表明，abi4结合其靶基因对结合基序的特异性要求不高，凝胶阻滞实验显示，某些不含abi4 特征性结合基序的基因依然表现出可以与abi4 相互结合的特性。abi4 转录因子通过与某些bzips类转录因子相互作用调控基因表达，表现出正或负的调控活性^[1]。

2. abi4转录因子与植物侧根的发育

2. 研究的基本内容和问题

目标一：构建正确的abi4基因表达载体

目标二：用构建好的表达载体导入农杆菌侵染wt型拟南芥花粉，以在子代拟南芥中得到阳性表达结果。

根据abi4转录因子的调控机制，我明白本实验的最终目标是得到侧根发育明显受抑制的植株（相较于wt型而言），即阳性表达结果。而关键问题是得出正确的表达载体。

3. 研究的方法与方案

实验方案：

1、种植wt型的种子，得到发育良好的wt型拟南芥

2、提取wt型拟南芥的rna，并逆转录出cdna

4. 研究创新点

从实验流程来讲，本实验的难点在于表达载体的构建，而大部分时间却耗在等待WT型的拟南芥长大上，因此，为了防止一次实验失败即耗费大量时间，我才用了滚动实验的方法，连续2周浸种、种植了不同批次、不同生长状况的拟南芥，以备将来之需。

5. 研究计划与进展

2月-阅读参考文献，了解实验流程。

3月-种植不同批次拟南芥，进实验室熟悉浸种、电泳、pcr等操作。

4月、5月-构建表达载体，侵染wt型拟南芥花粉