1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
课题意义与应用前景：
多粘菌素(polymyxin)被誉为人类抵抗革兰阴性菌感染的“最后一道防线”，是从多粘杆菌液中提取的一种多肽类抗生素，主要为多粘菌素b和多粘菌素e(又叫黏菌素，colistin)两种[1]。因其具有较强的肾毒性和神经毒性，限制了其临床上大规模应用[2]，一般用于兽药。然而目前碳青霉烯类抗生素耐药性的出现极大的限制了可用抗生素的选择，让这“最后防线”的使用也越来越多了，同时耐药率也逐年增加。多粘菌素耐药性的增加与质粒介导的mcr(mobile colistin resistance)基因的出现密切相关。相比主要通过基因垂直转移传递的染色体突变抗性基因，质粒介导的mcr基因可通过接合等方式完成基因的水平转移，甚至在种间传递，使得抗性菌株的数量与种类迅速攀升，抗生素治疗的形势越发严峻[3]。因此研究mcr基因对于明晰多粘菌素耐药性的产生机制、降低多粘菌素耐药性的方法以及新抗生素的开发等方向都具有重要意义。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标
初步探究mcr-1基因对宿主生物学特性的影响。
3. 研究的方法与方案
实验方案与技术路线：
mcr-1重组载体的构建——将mcr-1重组载体导入大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌———测量宿主的接合频率、生长曲线、适应性等。
宿主各含以下几种质粒：①mcr-1重组质粒：将mcr-1基因插入其他质粒骨架；②空载体：构建mcr-1重组载体时所用的质粒；③phnshp45，包含mcr-1基因，属于原始质粒；④mcr-1km：质粒phnshp45上用卡纳抗性基因替代mcr-1基因，属于mcr-1缺失质粒；⑤mcr-1重组质粒与mcr-1缺失质粒。
4. 研究创新点
最初发现并定义mcr-1基因的文章发表于2016年，因此mcr-1基因相关研究较少，属于很新的方向；且目前已发表的文献中尚未有关于mcr-1基因对细菌接合频率影响的研究，因此该切入点十分新颖独特。
5. 研究计划与进展
2017年12月：完成文献综述写作。
2018年1月至2月：完成文献查找、筛选及前期实验方案设计。
2018年3月：完成开题报告及mcr-1重组载体的构建。
