1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1本课题的意义
灰霉病菌（botrytis cinerea）是一种由空气传播的植物病原体，是危害200多种作物的世界性病害[1]。它引起花、果实、叶子、枝条和贮藏器官的腐烂，给人们带来巨大的经济损失[2]。该病菌的寄主范围非常广泛，蔬菜（如卷心菜、黄瓜、西兰花、豆类）和水果（葡萄、草莓、覆盆子、黑莓）受到的影响最严重[3]。
目前，灰霉病主要依赖于苯并咪唑类（如多菌灵、甲基托布津）、二羧酰亚胺类（如异噻菌胺、腐霉利、烯菌酮）、苯胺嘧啶类（如嘧菌环胺、嘧菌胺、嘧霉胺）和n-苯基氨基甲酸酯类（如乙霉威）等常用化学农药防治，但由于其遗传可塑性，灰霉病菌对这些常用杀菌剂产生了不同程度的抗性[4]。同时过多用药还会引起环境污染、破坏土壤微生物区系，导致农产品残留严重超标，甚至危及人畜健康。利用拮抗微生物的生物防治方法被认为是更安全、更友好、更能在农业生产中代替或者至少能作为减少化学农药使用的一种补充手段。近年来人们通过大量筛选和利用抗灰霉病的有益微生物及其代谢物，使生物防治正日益成为灰霉病控制中的一条重要而有效的途径。
2. 研究的基本内容和问题
1研究目标
筛选获得1株对灰霉具有拮抗作用的放线菌，对其进行鉴定，并验证其对灰霉菌的拮抗能力，从而丰富灰霉拮抗菌资源，为深入研究该菌株抗菌活性成分的种类、结构及其防病作用机制提供科学依据，为灰霉病的防治提供有效的替代生防制剂。
2研究内容
3. 研究的方法与方案
1研究方法
1.1土壤放线菌的分离与纯化
采用平板稀释法分离放线菌。采回土样后风干10天过筛，称取10g过筛土样倒入装有90ml无菌水的三角瓶中，28℃，180r·min－1震荡30min后静置5min，得到原液。取原液1ml并以10倍梯度稀释，配制成10－3、的悬浮液， 吸取100ul 土壤悬浮液涂布于6种不同培养基(含50mg·ml－1的k2gro7)平板上，均匀涂布后置于28℃培养观察，5～7d后挑取不同的单菌落划线纯化。
4. 研究创新点
通过单因素和正交试验对放线菌的发酵条件进行优化，以期得到最优化的培养条件用于后期推广应用，测定放线菌代谢产物对灰霉菌菌丝生长的影响，并进行离体防效研究，为今后灰霉病的生物防治奠定基础。
5. 研究计划与进展
1研究计划
2018.10-2018.11 查阅国内外相关文献，完成实验规划，进行预备实验
2018.12-2019.01 土壤放线菌的分离与纯化
