甲烷氧化菌5GB1C中不同浓度金属离子对Smmo基因表达的影响开题报告

 2022-02-07 20:42:35

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

一.课题意义

甲烷是天然气和沼气的主要成分,是仅次于二氧化碳的第二号温室气体,所引起的温室效应是同等质量二氧化碳的 20-30 倍[1],约占持久性温室气体总量的22,对全球气候具有重要影响。而甲烷同时还是一碳化工中最重要的原料,以甲烷为原料生产的一碳化学品(如甲醇)可以进一步合成重要的化工产品。因此,甲烷的开采、生成、转化和排放关系着能源、化工和环境等一系列重要问题,是全球关注的热点。甲烷是十分稳定的小分子,将甲烷转化为甲醇的工艺反应条件十分苛刻,目前在常温条件下,还没有一种化学试剂可以直接将甲烷氧化成甲醇,而甲烷氧化细菌可以实现这一转化。甲烷氧化菌可以参与大气碳循环[2],其可以在一定程度上减少甲烷的释放量,有助于碳循环;同时,在控制煤矿和油气田瓦斯气体上,其扮演了重要角色。因此其在能源、化工和环境等方面被寄予厚望。

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2. 研究的基本内容和问题

一.研究的目标

进一步验证及确定不同浓度的铜离子对smmo基因表达的影响,并初步研究不同浓度的锌离子、二价铁离子、三价铁离子对smmo基因表达的影响。

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3. 研究的方法与方案

一.研究方法

采用5gb1c 新型菌株(一种能以甲烷或甲醇为唯一碳源和能源快速生长的 i 型甲烷氧化菌)中的两种突变株进行试验,分别用不同浓度的各金属离子处理两种菌株后观察其smmo基因表达程度,再通过两种方法测得的结果进行横向及纵向比对分析,得出不同浓度的金属离子浓度对5gb1c菌株中smmo表达的影响。

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4. 研究创新点

本实验根据以往对铜离子影响甲烷氧化菌smmo基因表达研究进展的基础上,提出了其它金属离子对其表达影响的猜想,并选取与铜离子化学性相近的二价铁离子、三价铁离子、锌离子进行研究,试图从其它离子中寻找甲烷单加氧酶活性及转化效率的突破口。

本实验采用两种突变菌株,将smmo活性与荧光及xyle活性相联合,可更直观更方便地观测及测量smmo基因的表达程度。

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5. 研究计划与进展

研究计划:计划先进行xyle活性检测实验,分别得到各离子不同浓度下的xyle活性,在根据其数据设计出荧光实验中的各离子所添加的浓度梯度,进一步得出实验结果。各离子的基本实验结束后,可能需要添加新的实验组或对照组使数据更加完整。

预期进展:得到不同浓度铜离子、锌离子、二价铁离子、三价铁离子下smmo基因的表达结果,并分别分析总结出其影响规律。

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