1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
微生物除草剂是指在人们控制的条件下,能够有效防除特定杂草的活体微生物产品或微生物代谢产物(李永泉 等,2000)。
微生物除草剂分为微生物活体和微生物代谢产物两类,即利用活体微生物除草和利用微生物产生的代谢产物来防除杂草(kremer et al., 2005)。
微生物除草剂有两方面的显著特点,一方面是能够通过人工培养生产获得大批量的接种体;另一方面是能够快速侵染,并在较短时间内杀死杂草,称之为淹没式应用(刘占山,2007)。
2. 研究的基本内容和问题
采用模式植物拟南芥为植物材料,探索受到齐整小核菌(sclerotium rolfsii)(编号:sc64)侵染后寄主植物的防御机制。
拟选用实验室现有的典型拟南芥种群(对照:哥伦比亚型;易感:4号种群)。
通过比较上述两个生态型在受到侵染后的病症差异及免疫通路分子差异,阐述寄主收到sc64侵染后免疫通路的响应情况与抗病能力之间的关联。
3. 研究的方法与方案
1.培养两个生态型的拟南芥2.侵染不同时间伤害及表达量的比较侵染时间:(0h - 36h,以3h为时间间隔)拍照及imagepum比较叶片伤害程度不同侵染时间表达量测定,确定各通路的响应时间。
扫描电镜观察细胞壁破坏情况,比较差异3.不同侵染剂量梯度后伤害及表达量的比较侵染剂量变化拍照及imagepum比较叶片伤害程度不同侵染剂量表达量测定,确定各通路的响应时间。
扫描电镜观察细胞壁破坏情况,比较差异4.比较上述两个种群在受到侵染后的病症差异及其与免疫通路相关基因之间的关联,阐述拟南芥抵御sc64的机制。
4. 研究创新点
以往的研究中对齐整小核菌SC64的侵染机制揭示较多,但对于宿主抵抗其侵染的防御机制并未有过揭示,本实验就是以两种典型拟南芥种群来研究宿主对SC64侵染免疫通路相关基因的响应,从而揭示其防御机制。
5. 研究计划与进展
2017.9-10月:学习并熟练掌握拟南芥培养,基因提取,表达量测定等实验技术侵染时间点的探索2018.3月:不同侵染时间后表达量的检测,及伤害情况的比较扫描电镜实验的熟悉2018.4月:不同侵染剂量后表达量的检测,及伤害情况的比较扫描电镜实验的熟悉
