1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
一、课题意义：猪瘟（csf）是由猪瘟病毒（csfv）引起的严重危害养猪业的传染性疾病,被国际兽医局（oie）列为必须通报的传染病之一，它遍布于世界各国，对经济造成巨大的损失[1]。
mx蛋白已经被证实对猪瘟病毒有抑制作用[2]。
猪瘟病毒在分类学上属于黄病毒科（flavividae）的瘟病毒属（pestivirus），与它同科的病毒还有人类丙型肝炎病毒（hepatitis c virus，hcv），牛病毒性腹泻病毒（bovine viral dlarrhoea virus，bvdv）和羊边界病病毒（borider disease virus，bdv）。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究的目标证明鼠源mx1（mmmx1）蛋白有抑制猪瘟病毒增殖的的作用，并且是通过作用csfv复制过程中的rna-多聚酶，ns5非结构蛋白来抑制其增殖的。
2.研究的内容2.1.通过间接免疫荧光实验（ifa）、免疫印迹实验（western blot）鉴定mmmx1基因已经成功连接上pegfp-c1载体，并且可以在pk-15细胞上成功表达。
随后测定gtp酶活性来鉴定mmmx1蛋白活性。
3. 研究的方法与方案
1.间接免疫荧光、免疫印迹实验证明pEGFP-Mx1的表达2.测定GTP酶活证明mmMx1的活性3.荧光定量PCR、TCID50实验证明mmMx1抗猪瘟活性4.荧光定量PCR证明mmMx1抗猪瘟的浓度依赖性5.运用激光共聚焦、免疫共沉淀技术鉴别mmMx1与NS5B是否互作
4. 研究创新点
目前抗猪瘟的疫苗还不能做到百分之百的保护，所以要运用到抗病毒蛋白，干扰素本身就是一种抗病毒的蛋白质，Mx1是干扰素刺激机体产生的，目前还没有试验证明mmMx1具有抗猪瘟病毒的文章，因此对mmMx1抑制猪瘟病毒增殖进行初步研究。
5. 研究计划与进展
1.3月9号3月25号通过间接免疫荧光实验（ifa）、免疫印迹实验（wb）、测定gtp酶活性实验鉴定mmmx1基因已经成功连接上pegfp-c1载体，并表达出有gtp酶活性的mmmx1蛋白。
2.3月25号4月15号pk-15细胞转染pcdna-mmmx1（阴性对照pcdna3.0），转染24h后，接种csfv（moi=0.01），感染24h后收获上清和细胞沉淀，鉴定mmmx1抗csfv的效果。
3.4月15号5月1号ns5b蛋白是csfv增殖过程中的rna多聚酶，用pdsred载体接ns5b基因并表达，通过激光共聚焦定位技术、免疫共沉淀技术鉴别pcdna-mmmx1与pdsred-ns5b是否发生互作，来研究鼠mx1抑制猪瘟病毒增殖的机制。
