1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.课题意义随着温室效应的加剧，全球气候变暖已经成为现代农业生产体系和世界食品安全所面临的严峻挑战。
高温灾害性气候作为一种非生物胁迫影响着作物产量。
马铃薯（solanum tuberosum l.）是仅次于水稻、小麦和玉米之外的第四大经济作物，也饱受其害。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目的本课题旨在以马铃薯为研究对象，通过研究热处理下，油菜素甾醇合成途径和信号通路中各关键酶的表达变化，以及后续施加24-ebl，测定hsfs的定量表达并进行表型分析，初步探究hsfs在油菜素甾醇调控耐热中的作用，为探索其中复杂的分子机制打下基础。
2.研究内容1）油菜素甾醇促进马铃薯耐热性的表型分析对完整马铃薯植株进行24-ebl和蒸馏水（空白对照）处理，在高温胁迫下，观察两者表型变化。
2）br在合成和信号转导途径上应对高温胁迫的分子机制热处理后，通过rt-pcr得到brs合成途径中关键酶cpd，dwf4，det2和信号通路中关键酶bin2，bzr1，bri1基因的表达量变化情况。
3. 研究的方法与方案
1.研究方法与实验方案1）生理实验揭示油菜素甾醇提高马铃薯的耐热能力（1）固培一个月的组培苗放入水培30天后，设置2组实验：水培马铃薯和含1μm ebl的水培马铃薯45℃下生长一段时间（4h，8h，18h，24h），观察其生存率和叶片萎焉程度等情况。
（2）设置两组不同的固体培养基，一组为对照，一组含有1μm ebl，将马铃薯在22℃下培养14天，转到45℃下生长4h，再放回22℃恢复生长7天，观察其生存率。
2）定量pcr揭示热胁迫下油菜素甾醇信号的变化将土培苗生长50天后放到45℃进行长期生长，选取0，2h，6h和24h小时后的叶片，提取rna，反转录成cdna，使用美国abi公司steponeplus型实时荧光定pcr仪和faststar universal sybr green master(rox)试剂盒（roche），以saur2和stactin为内参基因，进行brs合成途径中关键酶cpd，dwf4，det2和信号通路中关键酶bin2，bzr1，bri1基因表达的实时荧光定量pcr，得到br合成和信号转导途径关键酶的表达变化情况。
4. 研究创新点
国内外虽然都有在不同植物上发现油菜素甾醇提高植物耐热性这一特征，但没有将植物体内同样参与调控耐热的HSFs与之联系，而本课题将深入探究两者在基因表达调控上的相互作用关系，为后续透析油菜素甾醇调控耐热机制奠定基础。
5. 研究计划与进展
1.研究计划2017.11-2018.2： 用24-ebl和蒸馏水处理后，获得马铃薯全长cdna序列，通过rt-pcr得到hsfs家族的表达情况，与此同时培养并处理完整马铃薯植株，观察表型。
2018.3-2018.4： 热处理后，通过rt-pcr得到brs合成途径中关键酶cpd，dwf4，det2和信号通路中关键酶bin2，bzr1，bri1基因的表达量变化情况2018.4-2018.5： 处理数据和图表，撰写论文。
2.预期进展1）获得热处理下，brs合成和信号转导途径中各关键酶的表达量变化情况。
