日粮中不同比例的非纤维性碳水化合物的含量对波杂山羊瘤胃微生物多样性的影响开题报告

 2022-02-08 20:11:20

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

反刍动物与单胃动物最大的区别在于其消化系统由四个胃室组成,其中瘤胃体积最大,约占四个胃室总容积的80% [1]。

瘤胃有三个主要功能:发酵功能;吸收功能以及屏障功能。

瘤胃是反刍动物消化代谢和营养吸收最重要的场所,反刍动物摄入的日粮绝大部分在瘤胃中进行微生物消化和机械性消化。

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2. 研究的基本内容和问题

一、研究目标本试验以山羊为研究对象,研究在日粮中添加高、中、低比例非纤维性碳水化合物(nfc)后,通过16s rrna基因测序技术研究日粮nfc比例对山羊瘤胃液内微生物群落结构和群落多样性的调节。

二、研究内容研究发现日粮能通过影响瘤胃腔内的环境从而对瘤胃微生物的种群结构和数量分布产生影响。

nfc是反刍动物主要的能量和营养来源。

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3. 研究的方法与方案

一、研究方法本研究采用实验方法进行研究,实验材料为8只雄性波杂山羊(波尔羊长江三角洲白羊),自由饲喂两周后,随机分成4组(高nfc、中nfc、低nfc、高蛋白质)。

实验期间每天固定在7时和下午16时饲喂。

4周后在晨喂8小时后屠宰收集瘤胃胃液样本。

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4. 研究创新点

反当动物拥有非常特殊的消化系统,其瘤胃内定植了高密度的微生物,能够降解植物纤维,为宿主提供可吸收的营养物质,一旦瘤胃内微生物组成发生了改变,将会直接影响动物正常的生理功能,甚至引发某些疾病。

有研究发现,饲粮和品种是影响瘤胃微生物多样性的重要影响因素,但以往的研究缺乏一种高效、低成本的测定微生物序列的方法,新兴技术高通量测序方法能够通过深度测序获得样品中绝大部分微生物的序列。

在以往这些对于反当兽瘤胃微生物的研究中,试验动物主要集中在奶牛,肉牛,水牛,绵羊,鹿等动物上,对山羊瘤胃微生物的研究相对较少,而对于饲粮成分变化对山羊瘤胃微生物的影响的硏究则更少。

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5. 研究计划与进展

一、研究计划2017年11月22日2017年12月22日:分组饲喂购买于当地农场的8只波杂羊2017年12月23日2018年1月3日:分批屠宰取样2018年3月2018年5月:瘤胃微生物16s扩增子测序分析2018年5月:撰写论文二、预期进展2018年1月3日完成波杂羊的饲喂、宰杀和取样工作。

2018年3月开始对收集的波杂羊瘤胃胃液样本首先进行瘤胃微生物宏基因组dna提取,对所提取的dna的质量检测后进行16srna基因的pcr扩增、高通量测序。

测序完成后用生物信息工具对比聚类outs,相似性大于97%的序列聚成同一out,并进一步分析其微生物群落组成。

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