筛选酿酒酵母中与Dsl1复合体亚基互作的细胞自噬相关蛋白开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1 本课题研究意义

细胞自噬是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程，能依赖于细胞内的溶酶体（酵母为液泡）介导胞内物质降解。细胞内一些损坏的蛋白或细胞器等通过自噬途径降解用于新物质的合成，使胞内物质得以循环利用^[1]，进而影响生物体的生理过程。如植物中细胞自噬参与生长、发育、衰老、免疫反应以及对事物和非生物胁迫等的应答过程^[2,3,4]，动物中细胞自噬参与免疫反应、肿瘤形成、神经退行性疾病及衰老等过程^[5,6,7]。但是，目前对细胞自噬的了解仍然有限，深度阐明细胞自噬的调控机理具有重要的理论意义与应用价值。

2 国内外研究概况

2. 研究的基本内容和问题

1 课题研究目标

利用酵母双杂交技术对dsl1复合体各亚基与细胞自噬相关蛋白之间物理互作进行探讨。

2 研究内容

3. 研究的方法与方案

1 研究方法与实验方案

1.1扩增目的基因全长序列

利用pcr扩增技术扩增目的基因dsl1、dsl3和tip20的序列。

4. 研究创新点

Dsl1复合体是目前为止发现的最简单的多亚基复合体，位于内质网上，启动高尔基体产生的COPI囊泡与内质网膜的融合，而本实验室前期工作发现Dsl1复合体亚基也参与细胞自噬运输，但它们参与细胞自噬的分子机制并不清楚，本课题通过酵母双杂交技术检测Dsl1复合体亚基Dsl1、Dsl3和Tip20与细胞自噬相关蛋白之间可能存在的物理互作关系，这对阐明Dsl1复合体亚基Dsl1、Dsl3和Tip20调控细胞自噬的分子机制提供坚实的基础。

5. 研究计划与进展

本课题计划于2月中旬开始

第一阶段：预计2周

完成目的基因片段的扩增以及载体的构建