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1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.本课题的意义近年来，镰刀菌引起的粮谷污染在世界各地高频率发生，玉米在采前、采后和贮藏阶段易受其侵染，从而导致伏马毒素严重超标，引发食品安全问题。
伏马毒素有a、b、c、p四类[3]共11种，其中伏马毒素b1（fb1）毒性最强，最为常见[4]。
fb1是一种水溶性真菌毒素，热稳定性好，主要由镰刀菌污染农作物产生，具有潜在致癌能力。
2. 研究的基本内容和问题
1. 研究的目标从感染镰刀菌的谷物样品中分离出一株伏马毒素高产菌，将菌株在大米培养基中发酵产毒，通过液-液分离技术纯化粗提物，以期获得大量高纯度毒素。
本研究旨在筛选高速逆流色谱体系，优化纯化条件，从而得到一种低成本和高回收率的fb1制备技术。
2. 内容2.1伏马毒素高产菌株的筛选及鉴定 2.2伏马毒素的提取及检测 2.3伏马毒素的分离与纯化 3.拟解决的关键问题分离出一株伏马毒素高产菌。
3. 研究的方法与方案
1.研究方法利用单孢分离的方法，分离产伏马毒素的菌株，进行产毒能力测定，筛选出伏马毒素高产菌，通过种群和化学型鉴定判断其种属。利用大米培养基接种伏马毒素高产菌后发酵产毒，萃取除杂后得到的粗提液过C18柱分离出FB1，设计合理的溶剂体系和仪器参数，利用高速逆流色谱进一步分离FB1，最后使用硅胶柱纯化得到纯度达98%的FB1。3. 技术路线3.实验方案及可行性分析3.1采集感染镰刀菌的发霉水稻或杂草，实验室拥有成熟的分离镰刀菌的实验方法，可满足实验需求。3.2伏马毒素的检测方法多样，选用高效液相色谱法，该法操作简单、灵敏度高、稳定性好，主要流程是先从样品中提取伏马毒素，经净化后与含有荧光性质的衍生剂如邻苯二甲醛(OPA)形成具有荧光特性的衍生物，然后通过荧光检测器检测。3.3高速逆流色谱是一种液-液分配色谱，克服了固定相载体带来的吸附、污染和峰形拖尾等缺点，可运用多种洗脱方式在短时间内分离极性范围较广的化合物，在天然产物的分离方面具有广泛的应用前景，可以用于伏马毒素的分离纯化。需要参考大量文献进行试验，以设计合理的溶剂体系、选择合适的仪器参数。该实验室拥有相关的制备仪器，可满足实验需求。
4. 研究创新点
试验利用单孢分离的方法分离伏马毒素高产菌。试验采用液-液分离技术，可降低制备成本并提高制备产量。
5. 研究计划与进展
1、研究计划1) 2018.9-2018.10 查阅资料，整理实验思路，学习基本方法。
2) 2018.10-2018.12 进行实验，分析结果，总结经验。
3) 2019.1-2019.3 收集、整理、处理实验数据。
