产半乳糖苷酶菌株的筛选、基因克隆和酶学性质研究开题报告

 2022-01-19 22:30:48

全文总字数:4266字

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

本课题的意义

α-半乳糖苷酶广泛分布于各种动物、植物和微生物体内。α-半乳糖苷酶可以专一性催化α-半乳糖苷键的断裂,并具有转糖苷的作用,因此在饲料、食品及化工等行业有着广泛的应用。α-半乳糖苷酶不仅在食品工业中的用途越来越广阔,在生物技术领域如基因工程、酶工程、蛋白质工程等方面也都发挥着重要作用,并开始广泛应用于医药等领域,极具应用前景。由于α-半乳糖苷酶的生产成本高,产量低,并且在高温或者不同ph环境下易失活,其广泛应用又受到了限制[1]。本研究旨在从不同土壤中筛选出具有高效产酶活性的α-半乳糖苷酶基因,构建高效表达和分泌的基因工程菌株,为工业应用提供酶学性质优良、高产低廉的α-半乳糖苷酶[2]

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2. 研究的基本内容和问题

(一)研究目标

从土壤中筛选获得α-半乳糖苷酶的高产菌株,对其α-半乳糖苷酶进行克隆表达,并对其进行酶学性质分析,以期获得具有工业应用价值的新型α-半乳糖苷酶。

(二)研究内容

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3. 研究的方法与方案

研究方法

1.通过稀释涂布平板法筛选目的菌株

2.通过平板划线法对目的菌株进行分离纯化

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4. 研究创新点

国内有关α-半乳糖苷酶产酶来源的探究仍不够全面,本课旨在从土壤中筛选出具有高效产酶活性α-半乳糖苷酶基因,构建酶学性质优良、高产低廉的α-半乳糖苷酶工程菌株。并且目前所纯化出的α-半乳糖苷酶对辅酶有特定要求,性质新颖,值得仔细探究。

5. 研究计划与进展

2018年7月—2018年10月

查阅国内外相关的文献,设计实验方案,实验材料的收集,学习相关生物信息学软件;

2018年10月—2018年12月

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