1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
细胞自噬是真核生物中高度保守的一类亚细胞降解途径,它通过降解细胞内组分维持细胞内生理平衡并帮助细胞度过逆境。细胞自噬发生后,能形成一种叫做自噬小体的双层膜结构,包裹细胞质和一些受损的细胞器,最终这些自噬小体与溶酶体(酵母中为液泡)发生融合,以完成对底物的降解[1]。细胞自噬不仅是生物体内的一种物质降解途径,同时在生物体生长发育、免疫防御、细胞程序性死亡、肿瘤抑制、神经性病变抑制等方面有非常重要的作用[2]。
snare(可溶性n-乙基-马来酰胺敏感因子结合蛋白受体)蛋白是介导囊泡与细胞膜或其它膜结构融合的主要蛋白分子[3],担负着囊泡运输过程中运输囊泡与区系的融合过程[4]。近年来研究表明大量的参与囊泡运输的snare蛋白同时参与细胞自噬过程[5],不同的snare蛋白调控细胞自噬的分子机制也不尽相同。
在酵母细胞中,调控内吞小泡与液泡融合的snare蛋白vam3和vam7同时也参与了自噬体与液泡的融合过程[6]。参与copi囊泡与内质网融合的snare蛋白ufe1和sec22也参与细胞自噬,其中ufe1通过copii囊泡影响自噬体的合成,从而影响细胞自噬[7];而sec22则通过影响自噬蛋白atg9的正常运输影响细胞自噬过程[8]。
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2. 研究的基本内容和问题
1 研究目标
通过对snare蛋白sed5的研究,初步阐明sed5是否影响细胞自噬及相应的调控机制。
2 研究内容
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3. 研究的方法与方案
1 研究方法
1.1测定细胞自噬水平
1.1.1pho8△60测定法
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4. 研究创新点
本研究初步地阐述调控内质网到高尔基体以及高尔基体内部的囊泡运输的SNARE蛋白Sed5如何调控细胞自噬过程。
5. 研究计划与进展
2015年:
09.1009.15 阅读相关文献、撰写开题报告
09.2010.15 alp检测自噬水平
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