1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
意义:禾本科植物内生真菌是指从外观无任何异常特征的健康植物组织内发现的菌类,可通过组织学方法或从表面消毒的植物组织内分离或从植物组织内直接扩增出微生物的dna 的方法来证明其内生,它们包括互惠和中性的内共生微生物,也包括在植物体内的一些潜伏的或条件致病的病原微生物,它和围绕宿主植物的其它微生物之间的相互作用是当今农业科学中的一个研究热点。
鹅观草内生真菌e. sinica是本实验室在国际上首先发现的具有宿主特异性的内生真菌[1]。
本研究以e. sinica为材料,明确禾本科植物内生真菌和土壤微生物群落的组成,菌群密度,相互关系及其在禾本科植物生长发育过程中所起的作用,为内生真菌和周围微生物资源的进一步研究和开发利用奠定理论基础,也为禾本科植物增产工作开辟新的思路和途径。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:1. 初步探究内生真菌与根系微生物之间的相关性;2. 探究内生真菌对植株生长过程中形态学的影响。
研究内容:本研究利用含有内生真菌和不含有内生真菌的遗传背景类似的植株群,在不同条件下进行常规栽培,调查两个群落之间的植株的变化、以及植株周围的微生物种类及密度,考察鹅观草体内的内生真菌对植株的作用。
具体分为田间试验和盆栽实验两个部分进行:1、田间试验:选择南农实验田地的地块开展试验,管理基本在自然条件进行。
3. 研究的方法与方案
i. 田间试验1 实验材料试验田的土壤;菌肥;供试培养基;2 实验方法2.1 土壤样品的采集:采用五点取样法,对种植鹅观草的实验田采集土壤的根际、非根际层(0-20 cm)新鲜土样1~1.5 kg,装在聚乙烯塑料袋带回试验室,5-24h内进行微生物分离。
2.2 土壤微生物的分离(1)分离培养基的制备供试培养基:马丁氏培养基、牛肉膏蛋白胨培养基于121 ℃灭菌30分钟,备用。
(2)土壤菌悬液的制备称取 10 g 土样稀释在 90 ml无菌水中,震荡,稀释为 10-2、10-3、10-4、10-5、10-6不同稀释度的土壤菌悬液。
4. 研究创新点
关于内生真菌与根系微生物之间的相关性方面的研究相对较少,本实验旨在明确禾本科植物内生真菌与土壤微生物群落的组成,菌群密度等,有可能为以后的研究提供参考。
关于鹅观草内生真菌e. sinica和围绕宿主植物的其它微生物之间的相互作用,至今在国内外涉及的较少。
但是,由于我国鹅观草属植物中内生真菌含量较高,且分布广泛,对鹅观草内生真菌e. sinica的研究也较为广泛。
5. 研究计划与进展
2015.9-2015.11试验田样品采集和实验田根系微生物群落的分离、纯化及保存。
2015.12-2016.3盆栽的试种和盆栽土壤微生物的分离、纯化和保存。
2016.3-2016.4 优势菌的生理生化反应鉴定及侵染机理2016.4-2016.5 文献阅读及毕业论文撰写、修改和完善
