1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
意义：保护性耕作是指通过少耕、免耕、地表微地形改造技术及地表覆盖、合理种植等综合配套措施，其核心技术包括少耕、免耕、缓坡地等高耕作、沟垄耕作、残茬覆盖耕作、秸秆覆盖等农田土壤表面耕作技术及其配套的专用机具等，配套技术包括绿色覆盖种植、作物轮作、带状种植、多作种植、合理密植、沙化草地恢复以及农田防护林建设等。
保护性耕作可保护农田、改善土壤结构、增加农民收益、保护生态环境，为发展可持续农业奠定了基础。
因此，研究保护性耕作具有重要的意义。
2. 研究的基本内容和问题
目标：本实验研究保护性耕作对纤维素降解菌多样性的影响及机制，旨在借鉴已有的研究成果及经验，系统了解保护性耕作与传统耕作的差异，为我国保护性耕作示范及推广提供科学理论根据。
内容：是否耕作和秸秆是否还田四种处理对土壤微生物多样性的影响。
拟解决的关键问题：系统了解保护性耕作与传统耕作的差异，为我国保护性耕作示范及推广提供科学理论根据，rflp技术为本研究提供了技术支持。
3. 研究的方法与方案
研究方法：对保护性耕作的土壤以是否耕作和秸秆是否还田设置四种长期处理， 实验分为两步：先通过平板稀释涂布法对四种土样中的细菌、真菌和放线菌进行计数，其次筛选纤维素降解菌，运用细菌16s rdna扩增、真菌its扩增、pcr产物ta克隆、测序等技术并通过文库数据统计与分析来对四种土样中纤维素降解菌的多样性进行研究。
技术路线：请看附件实验方案：该实验以是否耕作和秸秆是否还田两种因素设置了4个处理，为小区实验，每个处理4次重复。
翻耕处理采用人工翻地，翻耕深度为20~22cm。
4. 研究创新点
本实验能够较为系统的了解保护性耕作与传统耕作的差异，从土壤微生物群落的研究出发，为进一步探究保护性耕作的大范围推广提供一定的参考。
5. 研究计划与进展
2014.092014.10筛选纤维素降解菌2014.102014.12 DNA提取，扩增获得PCR产物2014.122015.1 PCR产物限制性内切酶酶切并电泳分析2015.12015.2 制备感受态细胞，TA克隆2015.22015.3 普通感受态细胞酶连产物转化2015.32015.4序列分析、比较，构建系统发育树，并进行论文写作。
