1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题的意义灵芝是一种大型真菌，属担子菌纲、多孔菌科、灵芝属（ganoderma），是我国的一种传统的名贵药材，在民间有悠久而广泛的应用，它的食、药用价值一直都是研究的热点。
灵芝三萜类化合物是灵芝的主要药用成分之一，具有抗氧化、抗病毒、降血压和抗肿瘤等活性。
近几年研究发现，灵芝生长或发酵的环境条件能显著影响灵芝三萜的产量,但对灵芝三萜的具体合成目前没有明确的报道。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标通过研究高温胁迫对ho沉默突变体菌丝生长和三萜合成的影响，探讨高温胁迫与灵芝三萜合成的关系，为阐明通过高温胁迫影响次生代谢产物灵芝三萜生物合成的分子机制奠定基础。
研究内容（1）不同高温胁迫时间下ho沉默突变体的生长情况。
（2）研究高温胁迫下灵芝三萜产量的变化，并检测中间代谢产物鲨烯和羊毛甾醇的变化，同时检测相关基因的表达。
3. 研究的方法与方案
研究方法（1）采用摇床培养法培养液体菌种。
液体培养基培养ho沉默突变体，随后高温胁迫处理，测定灵芝三萜产量的变化，uplc检测鲨烯和羊毛甾醇产量。
（2）采用平板培养插片观察菌丝形态及分叉，采用nbt染色观察ros含量，荧光检测no等含量，建立高温胁迫与ho、no以及ros的联系。
4. 研究创新点
特色或创新之处本实验系统地研究了高温胁迫对灵芝三萜生物合成的影响，对HO与灵芝次生代谢的关系进行了初步研究，并将首次建立高温胁迫与HO、NO及ROS之间的联系。
5. 研究计划与进展
研究计划(1)2014.8-2014.9 查阅资料，整理实验思路，准备实验器材(2)2014.10-2014.11 初步研究高温胁迫对ho沉默突变体生长及三萜的影响，分析结果，总结经验(3)2014.12-2015.2 开始进行摇床和平板实验，同时观察菌丝分叉及nbt染色等。
收集、整理、处理实验数据。
(4)2015.3-2015.4 处理分析实验数据方差分析，f因子测验，多重比较分析，写毕业论文（设计）预期进展1) 确定高温胁迫对ho沉默突变体次生代谢的具体影响。
