1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
干旱、洪涝、高温或严寒，强光照、重金属等非生物胁迫显著影响作物的生长和产量，严重威胁着农业生产。
非生物胁迫是全球作物低产的最主要原因之一，降低了大多数主要作物的平均产量的50%以上。
大多数非生物胁迫直接或间接产生自由基和活性氧簇，造成氧胁迫。
2. 研究的基本内容和问题
对莱茵衣藻中的CrSAP2基因作如下处理：设置三组材料，一组是CrSAP2基因低表达，一组是CrSAP2基因常量表达，还有一组是CrSAP2基因高表达。
然后让这三组莱茵衣藻在重金属胁迫的培养条件下生长，分别记录并比较三组材料细胞内的各抗胁迫相关物质的积累量，总结规律，验证猜想CrSAP2基因在莱茵衣藻中的功能是抗非生物胁迫的。
3. 研究的方法与方案
一、研究方法及技术路线：1.用氯仿-异戊醇法抽提莱茵衣藻dna，设计引物，用pcr技术扩增获取目的基因片段，用凝胶电泳技术验证目的条带，用试剂盒纯化回收凝胶中的目的基因片段。
2.用克隆载体p easy-b连接目的基因，转化得到克隆载体，用pcr技术验证转入克隆载体的大肠杆菌菌液，试剂盒提取已转化菌液中的克隆载体质粒。
3.再用双酶切技术获得目的基因片段，用于构建表达载体（35s::正反义目的基因），转化大肠杆菌并pcr、电泳验证菌液，试剂盒提取表达载体质粒。
4. 研究创新点
sap(stress associated protein)是近些年发现的一个新型基因家族，其成员有一个共同特点，就是在所编码的蛋白上有一个a20/an1区域。
尽管人们对于a20/an1锌指蛋白在动物中对免疫应答的调控作用已有了解，但在植物中的研究却还不多，仅在如水稻，拟南芥，獐毛，转基因烟草等作（植）物中。
关于莱茵衣藻的研究在所有模式生物中并不算多，它起步的较晚，主要是治理污水方面的应用研究。
5. 研究计划与进展
现在已构建得到crsap2过表达载体和其干扰载体。
正在进行的步骤是：玻璃珠法转化莱茵衣藻，转基因藻的鉴定。
预期在1-2月内得到转基因藻。
