1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
脂是细胞膜的基本组成成分,主要包括甘油脂、胆固醇和鞘脂。
鞘脂是真核生物细胞膜必不可少的部分,早在1884年就由j.lw.thudichum命名了鞘脂。
鞘脂(sls)是含有长链鞘样碱基骨架的一类结构复杂的脂类分子。
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2. 研究的基本内容和问题
酵母中合成神经酰胺合酶的基因lac1和lag1包含tlc(tram-lag1-cln8)结构域,lac1和lag1合成c26神经酰胺,缺失突变体影响酵母的胞质分裂。
动物中cers(1-6)也包含tlc结构域,分别合成具有不同碳链长度的神经酰胺,cer1合成c16神经酰胺,cer2合成c22至24神经酰胺,cer3合成c26神经酰胺,cer4合成18至20神经酰胺,cer5合成c16神经酰胺,cer6合成c14至16神经酰胺。
cln8在哺乳动物神经细胞内质网表达,一些证据表明cln8可能参与c16/c18/c24/c24:1神经酰胺的合成。
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3. 研究的方法与方案
回补实验 1.构建attlc1-1基因组全长载体回补突变体表型。
2.酵母回补实验 通过回补酵母突变体分析attlc1-1的功能。
3.亚细胞定位a. 瞬时表达通过构建瞬时表达载体,在拟南芥原生质体中观察attlc1-1的定位情况。
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4. 研究创新点
5. 研究计划与进展
通过酵母互补实验以及突变体内脂质变化,确定attlc1-1是否参与拟南芥体内神经酰胺及鞘脂的合成,执行合酶的功能。
现认为attlc1-1可能通过影响对拟南芥生长发育起重要作用的鞘脂类或其他脂类,进而影响auxin在植物体内的转运。
而auxin对植物生长发育起重要作用,auxin的转运出错或浓度发生变化都将对植物产生重大影响。
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