1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
一、安慰剂及安慰剂效应
安慰剂,在医疗方面用来描述使患者感到舒适的无害处理[1,2]。当患者接受实际上没有药理作用且无毒副作用的药物或疗法,病情症状却有所改善[3].安慰剂效应通常定义为由药物、药剂或程序等作用产生的与其药理活性无关的效应,临床上可促使患者的生理或心理状态发生改变,从而增强或干预治疗效果[4]。
二、安慰剂镇痛机理研究现况
2. 研究的基本内容和问题
一、研究目标
利用阿片类及非阿片类药物建立安慰剂镇痛的大鼠模型,研究海马体在安慰剂镇痛效应形成与维持过程中的神经生物学作用机制。
二、研究内容
1、建立安慰剂镇痛效应的大鼠模型
取体重250-300g的实验大鼠,随机分为4组(n=16),每天上午8:00和下午8:00(即测痛30分钟前)进行药物注射,建立阿片类及非阿片类药物诱导的安慰剂镇痛模型,具体流程如下。
表1 大鼠模型建立实验处理流程图
Group | Day 1 | Day 2 | Day 3 | Day 4 | Day 5 | |||||
AM | PM | AM | PM | AM | PM | AM | PM | AM | PM | |
1 | NT | NT | NT | NT | NT | NT | NT | NT | NT | NT |
2 | NT | NT | NS | NS | NT | NT | NS | NS | NT | NT |
3 | NS | Mor cue | Mor cue | NS | NS | Mor cue | Mor cue | NS | NS cue | NT |
4 | NS | Par cue | Par cue | NS | NS | Par cue | Par cue | NS | NS cue | NT |
注:NT,无处理;NS,注射生理盐水;Mor,注射吗啡;Par,注射帕瑞昔布;cue,光照暗示。
2、测定大鼠热痛阈值
采用辐射热法测定大鼠热痛阈值,在药物注射30分钟后进行测定。辐射热测痛仪的辐射热由一个产生红外辐射的灯泡供给,通过调整聚光透镜照射到大鼠后侧右脚皮肤上产生热刺激。以热刺激引起抬足的潜伏期为指标,即热痛阈值。
3、研究海马体在安慰剂镇痛机制的神经生物学机制
采用脑套管技术进行机制研究,用戊巴比妥钠对实验大鼠进行深度麻醉,将不锈钢灌流套管定位植入到海马体,造模成功后给予海马区注射抑制剂muscimo(GABAA受体兴奋剂)并测痛,研究海马体在参与安慰剂镇痛机制中的生物学作用。
三、拟解决的关键问题
研究海马体是否参与介导安慰剂镇痛效应的形成及维持。
3. 研究的方法与方案
一、研究方法与实验方案
1、实验大鼠的准备
取体重250-300g雄性实验大鼠,于实验前2-3天饲养于北京大学医学部实验动物部,给予12:12h的光暗环境(7:00a.m.开始光照),恒温条件211℃,并提供充足的食物饮水条件。
2、海马体埋置套管
采用戊巴比妥钠(50mg/kg)对实验大鼠进行深度麻醉,将不锈钢灌流套管(30 gauge)定位埋置入海马体中,术后接受青霉素(16,000 U/只)消炎处理,给予7天恢复期。
3、建立阿片/非阿片类药物诱导的安慰剂镇痛效应模型
套管埋置成功后建立药物诱导安慰剂镇痛模型。阿片类药物吗啡注射剂量为10mg/kg,溶于0.9%生理盐水;非阿片类药物帕瑞昔布注射剂量为8mg/kg,溶于0.9%生理盐水;生理盐水(0.9%)。取实验大鼠随机分为4组(n=16),每天上午8:00和下午8:00通过腹腔注射给药(给药方案见表1),部分处理组给药同时加以蓝光照射,形成光照暗示。给药30分钟后采用辐射热法测痛,通过数据分析明确造模是否成功。
4、研究海马参与安慰剂镇痛效应的表达
造模组和对照组老鼠各分为2亚组(n=8),分别通过套管灌流muscimo后测痛,明确海马体对大鼠阿片/非阿片类药物诱导的安慰剂镇痛效应的表达起到的神经生物学作用。
二、技术路线
三、可行性分析
1、实验技术方法成熟。指导教师团队在疼痛与镇痛的神经生物学机制方面积累了较丰富的经验,实验技术方法成熟。本课题的研究计划已经划分,步骤详细切实可行,工作量适中,可以如期完成结题报告。
2、实验环境设备完善。本实验依托于北京大学神经科学研究所。研究所位于北京大学医学部院内,是神经科学教育部重点实验室、卫生部神经科学重点实验室、北京大学基础医学院神经生物学系(国家神经生物学重点学科)。疼痛与镇痛的神经生物学机制一直是该的研究方向,具有先进配套的仪器设备,能够提供良好的实验平台。
3、实验人员具备学习科研能力。申请学生马龙雨学习成绩优秀,参与主持2012年国家大学生创新性实验项目并顺利结题,具备科研学习的素质。
4. 研究创新点
安慰剂镇痛效应的神经生物学机制目前尚不完善,本课题率先研究在海马体是否参与安慰剂镇痛效应形成维持的神经生物学机制。
研究结果能够为安慰剂镇痛机制的深入研究提供可靠基础。
5. 研究计划与进展
研究时间 | 研究内容 |
2014/2-2014/3 | 建立安慰剂镇痛效应的大鼠模型 |
2014/3-2014/4 | 研究海马体在安慰剂镇痛效应形成中的神经生物学机制 |
2014/4-2014/5 | 综合分析数据并撰写论文 |
