小白菜BrHMA3基因启动子表达载体的构建及其在拟南芥中的表达开题报告

 2022-02-07 17:04:21

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

土壤是人类赖以生存的自然环境和农业生产的重要资源,由于人口的剧增和经济全球化的进一步发展,人类活动导致的环境污染问题不断增加、恶化,世界范围内土壤重金属污染问题已十分严峻。土壤镉(cd)污染是众多环境污染问题中较为严峻的一个。土壤中的镉污染主要是随着采矿、冶炼和电镀工业的不断发展而积累的。土壤环境的恶化,导致了农产品重金属含量的不断增加。国外农田土壤生产的蔬菜也存在不同程度的重金属污染。目前,我国蔬菜重金属污染较严重,总体上以cd的污染形势最为严峻,不同蔬菜种类的污染程度顺序为:叶菜类前果类豆类瓜果类(刘景红等,2004)。

cd是植物的非必需元素,毒性极强,当土壤cd含量超出临界值时,就会影响植物生长,表现为生长减缓,叶片变黄,甚至枯死。随着cd污染的加重,会导致菠菜vc、叶绿素、可溶性糖和蛋白质含量降低,亚硝酸盐含量升高,品质变差(解静芳等,2010)。菠菜cd毒害首先作用于老叶,失绿变黄至灰白,叶柄收缩变软(宗良纲等,2007)。

普通白菜(不结球白菜)(brassicachinensis)又称小白菜、青菜,属于十字花科芸苔属芸苔种小白菜亚种,原产我国,为长江流域普遍栽培的一种大众化蔬菜,北方亦栽培,品种众多,在蔬菜周年供应中占有重要地位。陈瑛等(2009)通过盆栽试验,研究了60个小白菜品种在0.6mg/kg和1.2mg/kg土壤镉浓度下吸收和积累镉的能力差异。结果表明两种浓度下有不同程度的超标率,后者约是前者的8倍,表明小白菜容易受到镉污染。不同小白菜品种间对镉的吸收与累积有显著地差异性(张菊平等2013)。

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2. 研究的基本内容和问题

2.1研究目标:

阐明控制不同小白菜品种镉积累特性差异的关键基因的表达差异的原因,并研究其可能的调控方式。

2.2研究内容:

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3. 研究的方法与方案

3.1研究方法

(1)控制不同品种小白菜镉积累的关键基因启动子克隆与序列分析:

以不同品种小白菜基因组dna为模板,利用特异引物扩增得到控制不同品种小白菜镉积累关键基因的启动子片段,连接到克隆载体后进行测序分析。

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4. 研究创新点

4.特色或创新之处

本课题根据不同小白菜品种对重金属镉的吸收不同,研究不同品种关键基因启动子的表达,并构建载体在拟南芥异源体系中表达,比较不同小白菜品种镉吸收与积累关键基因启动子表达差异。

目前,对小白菜吸收、积累镉的分子调控机制研究还处于空白。因此,阐明控制不同小白菜品种镉吸收、转运与积累差异的关键基因及其表达调控模式将为选育可食部位低积累镉的蔬菜新品种的分子辅助育种提供重要的分子基础与技术支持。

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5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

3月1日-3月10日构建四个品种小白菜启动子-gus表达载体构建;

3月11日-3月20日准备拟南芥幼苗;

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