1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义
灵芝是一种大型真菌,属担子菌纲、多孔菌科、灵芝属(ganoderma),是我国的一种传统的名贵药材,在民间有悠久而广泛的应用,中医学认为它起滋补强壮、扶正固本的作用。灵芝对人类健康的作用也日益受到国际上的重视,进一步开发灵芝的药用价值是当今药用菌研究的一个热点和前沿。
灵芝三萜类化合物是灵芝的主要药用成分之一,具有抗氧化、抗病毒、降血压和抗肿瘤等活性。灵芝三萜含量的多少是目前衡量灵芝质量高低的重要指标。近几年研究发现,灵芝生长或发酵的环境条件能显著影响灵芝三萜的产量。在目前灵芝三萜含量比较低的情况下,通过外源的环境因子诱导灵芝三萜的合成,将是一种有效地提高灵芝三萜含量的手段。
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2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标
通过研究l-精氨酸浓度对灵芝菌丝生长和三萜合成的影响,探讨灵芝氮代谢与灵芝三萜合成的关系,为阐明通过氮代谢影响次生代谢产物灵芝三萜生物合成的分子机制奠定基础。
2.研究内容
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3. 研究的方法与方案
1.研究方法
1)采用摇床培养法培养液体菌种。液体培养基培养灵芝,添加不同浓度的l-精氨酸处理,测定灵芝三萜产量的变化,uplc检测鲨烯和羊毛甾醇产量。
2)采用平板培养插片观察菌丝形态及分叉,采用ca离子探针孵育和nbt染色分别观察菌丝ca离子含量和ros产生量。建立氮代谢与ca离子及ros的联系。
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4. 研究创新点
本实验系统地研究了氮饥饿对灵芝三萜生物合成的影响,对氮代谢与灵芝次生代谢的关系进行了初步研究,并将首次建立氮代谢与Ca及ROS之间的联系。
5. 研究计划与进展
1.研究计划
1)2013.10-2013.11查阅资料,整理实验思路,准备实验器材
2)2013.11-2013.12初步研究不同l-精氨酸浓度对灵芝生长及三萜的影响,分析结果,总结经验
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