1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
课题意义：拟南芥转录因子stop1同时参与了抗铝毒和耐h 毒害。
stop1在水稻中有6个同源基因，其中os01g0871200（art2）与stop1同源性最高，其次为art1。
art2在水稻中的生物功能目前还不清楚，而art1被报道参与水稻抗铝毒但不参与水稻对h 的耐性。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：1.获得抗铝毒基因stop1分别与art1、art2进行融合构建的质粒。
2.获得将构建的质粒转入stop1（t-dna）拟南芥突变体后收获的纯合种子。
3.对各转基因株系进行抗铝毒和耐酸毒表型测定。
3. 研究的方法与方案
研究方法：1. 抗铝毒基因stop1分别与art1、art2进行融合构建：pcr扩增、酶切、同源重组、提质粒2获得pstop1-art1及pstop1-art1转基因系纯合种子：农杆菌转化法、潮霉素平板筛选3. pstop1-art1及pstop1-art1转基因系抗铝毒和耐酸毒根长表型分析：水培法、量根长实验方案：1.载体构建将抗铝毒基因stop1启动子与art1分别扩增后连接，hindiii和bamhi两种内切酶双酶切 pzh2b载体后同源重组。
2.获得转基因株系纯合种子农杆菌转化法用抗铝毒基因stop1分别与art1、art2进行融合构建的质粒侵染拟南芥stop1（t-dna）突变体，潮霉素筛选出有转基因的种子，繁殖，获得t2代种子，潮霉素再筛选选出31分离的单拷贝种子，再繁殖一代，获得t3代种子，潮霉素筛选选择表型不分离的种子为纯合种子。
3.纯合种子抗酸铝毒表型分析1) hoagl水培获得的转基因株系纯合种子，以col和突变体stop1（t-dna）做对照，设置0 μm、2 μm、4 μm 3个铝浓度处理，ph 5.7,10d后分别测量其根长。
4. 研究创新点
本课题采用突变体stop1表型回补的方式来研究ART1和ART2在拟南芥中抗铝毒和耐H 毒害的功能差异，即将STOP1启动子分别与ART1和ART2融合再转入stop1中，然后分析转基因株系对铝毒和H 毒害的耐性。
5. 研究计划与进展
2014/10-2015/1ART1 5 个同源基因在水稻中的表达2015/1-2015/2 STOP1启动子和ART1、ART2融合载体构建2015/2-2015/4 农杆菌转化以及潮霉素筛选获得转基因纯合株 2015/5水培转基因纯合株系抗酸铝毒表型分析 以上是本项目的大致安排，因研究内容互相关联，工作的重心根据实验的具体进展情况进行适当调整。
