1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
盐胁迫是植物体经常遭受的非生物胁迫之一，在世界范围对作物生产会造成重大损失。
研究植物感受、应答高盐胁迫的分子机制将有助于选育抗逆作物品种（carlos等，2013）。
近些年研究表明，植物磷脂酶d（phospholipase d，pld）是植物耐盐胁迫信号中的重要组成部分（bastiaan 等，2009）。
2. 研究的基本内容和问题
（一）研究目标1）用分子生物学方法确定pa与pid结合位点；2） 从遗传和分子水平上明确pid是否与拟南芥pld介导的耐盐信号转导相关；3）通过细胞生物学方法研究盐胁迫下pa对pid的影响。
（二）研究内容1）分析拟南芥pid基因序列，找到pa与pid蛋白的结合位点。
2）观察盐处理下，各突变、野生型及回补材料的根长表型。
3. 研究的方法与方案
（一）研究思路和技术路线盐处理拟南芥，pld活性被激活，产生pa，pa可以与蛋白激酶pid结合，使生长素分布发生变化，从而影响拟南芥发育。
（二）试验方案1）通过膜脂结合实验，先确定pa与pid蛋白结合；然后截断pid，找到与pa结合的片段，利用点突变技术及膜脂结合实验，找到与pa的结合位点。
2）从拟南芥数据库tari购买pid基因和pin2基因突变体，利用三引物法筛选纯合体。
4. 研究创新点
1）通过杂交、转基因等手段获得纯合体材料。
2）从分子水平明确pa与pid结合位点。
3） 从遗传和分子水平上确定pid在pld介导盐信号调控生长素通路中的作用。
5. 研究计划与进展
2015/5-2015/6克隆pid基因，构建其his标签载体，转入bl21，原核表达蛋白；做膜脂结合实验，找到pid蛋白与pa结合位点，并构建相应过表达载体；筛选pid基因突变体、pin2基因突变体，构建回补材料。
2015/7-2016/6 初步确定nacl处理后，与野生型相比，pid基因突变体和pin2基因突变体有表型；各种转基因繁种鉴定纯合体，所得材料从体内验证pa对pid蛋白的调控作用，同时体外验证两者关系。
2016/6 查看文献，补充实验；整理实验数据，撰写论文。
