细胞力学微环境对神经干细胞向神经元定向分化的影响开题报告

 2022-02-07 17:23:28

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

神经干细胞(nsc)是一种具有长期自我更新和分化能力的原始神经细胞,可分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞等。

将其植入受损脑组织后,可以代替损伤和丢失的神经细胞;同时,整合到宿主的大脑中可以重建受损的神经环路,支持和调动内源性神经细胞的修复反应(如轴突生长和神经元链状排列);另外,还能保护神经元和减轻脑损伤后的炎症反应[1]。

因此, nsc在治疗脑损伤方面(如创伤后脑损伤)有很大的应用潜力。

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2. 研究的基本内容和问题

一、研究目标本项目的目标是在微观水平上构建具有能模拟nsc外三维微环境且有定向诱导nsc分化功能的神经微组织支架,以此作为一种有效工具来研究脑组织再生的规律和机制。

具体目标如下:(1) 合成新型软弹性光交联明胶。

采用光交联基团,通过调节光交联基团(甲基丙烯酰基团)的取代度与光交联明胶的浓度,调控材料的力学性能(弹性模量及拉伸强度),从而构建软弹性载nsc水凝胶。

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3. 研究的方法与方案

一、拟采取的研究方案本课题旨在从以下四方面取得突破:(1)新型光交联明胶的合成;(2)载nsc水凝胶的制备;(3)能引导nsc定向分化的细胞外力学微环境的构建;(4)载nsc水凝胶电传导功能的检测1.新型光交联明胶(gelma)的合成称取两份100 ml磷酸缓冲液并加热至50℃,向其中各加入10 g明胶粉末,加热搅拌1 h至完全溶解;随后,在两份明胶溶液中分别缓慢滴加2和8 ml甲基丙烯酸酐,以制备不同甲基丙烯酰基团取代度的gelma;将上述溶液继续搅拌2.5 h至反应完全后装入透析袋(截留分子量:8000~14000 da),40℃去离子水中透析1周,每24 h换水;透析完成后,采用微孔滤膜(孔径:0.45μm)过滤;将过滤后的溶液放入-80℃冰箱预冻后冷冻干燥并收集样品。

检测所合成材料的化学结构。

(1) 化学分析:采用核磁共振光谱(nmr)表征合成水凝胶的结构和成分,分析其化学键组成和材料引入甲基丙烯酰基团前后化学键的变化。

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4. 研究创新点

本项目拟用甲基丙烯酰基团来修饰明胶,通过改变光交联基团的取代度和光交联明胶的浓度,形成疏松的交联网络结构,从而提高水凝胶的柔软度和弹性;调控材料的力学性能并给细胞提供一定的力学刺激,以实现NSC向神经元方向的分化;揭示力学微环境对细胞行为和功能的影响规律和机制,有望解决NSC难以定向分化为功能性神经元的问题,为大范围脑损伤的修复治疗提供新的思路和方法。

5. 研究计划与进展

一、 研究计划论文计划在6个月的时间内完成。

(1)选题起止时间:2015年12月至2016年1月(2)进行文献资料检索和阅读起止时间:2016年1月至2月(3)完成开题报告起止时间:2016年2月至3月 (4)实验以及论文初稿的撰写起止时间:2015年12月至2016年5月(5)论文的修改和定稿起止时间:2016年5月至6月(6)论文印刷、准备答辩二、预期进展提交论文一份

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